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c-Junによるインスリン遺伝子発現制御のメカニズム

c-Jun调控胰岛素基因表达的机制

基本信息

批准号：
06770797
负责人：
稲垣暢也
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Chiba University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770797/
关键词：
インスリン遺伝子 cAMP反応性塩基配列転写因子 c-Jun

项目摘要

申請者らは、すでに、ヒトインスリン遺伝子のプロモーター領域に4ヵ所のcAMP反応性塩基配列(CRE)が存在し、c-JunがこれらのCREを介してインスリン遺伝子の発現やcAMP反応性を抑制する可能性について報告してきた。平成6年度は、♭1.まずc-Junの作用点について解析した。方法としてc-JunのDNA結合ドメインを欠失させた発現プラスミド(Δc-Jun)あるいはwild type c-Junの発現プラスミド(wt c-Jun)をヒトインスリンのプロモーターを連結させたCATプラスミドと共にハムスターのβ細胞株(HIT-T15)にトランスフェクションし、cAMPのインスリン遺伝子の転写活性に及ぼす効果について検討した。対照としてwt c-JunあるいはΔc-Junのかわりにβグロビンの発現プラスミドを用いた。その結果、wt c-Junをトランスフェクションした場合には、対照と比較してインスリン遺伝子の転写活性あるいはcAMP反応性は著しく抑制されたが、Δc-Junをトランスフェクションした場合、その抑制は対照と同レベルまで完全に解除された。従って、c-Junの抑制効果には、DNA結合領域が重要であることが明らかとなった。♭2.次にc-Junと同じファミリーに属し、ロイジンジッパー構造を有するc-Fos,Jun B,Jun Dについても、ヒトインスリン遺伝子の転写活性やcAMP反応性に及ぼす影響について検討した。その結果c-Fosはc-Junと同様に強い抑制効果を有したが、Jun B,Jun Dの抑制作用はc-Junやc-Fosに比して弱かった。これらの転写因子の発現量に及ぼすグルコース濃度の効果をHIT細胞を用いてノザン法で解析したところ、c-Junは培養液中のグルコースを除くことにより、著しい発現の増大を認めた。Jun Bもグルコース除去によりわずかに発現の増大を認めたが、c-Fos,Jun Dの発現量はグルコース濃度により変化を受けなかった。従って、低グルコース濃度に伴うインスリン遺伝子の転写抑制には、c-Junが最も重要な因子であることが予想された。

The applicant reported on the existence of cAMP anti-cAMP base alignment (CRE) in four different domains, and the possibility of cAMP anti-cAMP inhibition mediated by CRE. Heisei 6th year, 1. c-Jun's point of action Methods: DNA binding protein of c-Jun was detected by PCR, and the expression of cAMP was detected by PCR in wild type c-Jun. For example, if you want to change the color of the material, you can change it. The results showed that the cAMP activity was inhibited by wt c-Jun in the case of wt c-Jun, and the inhibition was completely eliminated by wt c-Jun in the case of wt c-Jun. The inhibition effect of c-Jun is very important in DNA binding domain. 2. The secondary c-Jun and c-Jun are related to the structure of c-Fos,Jun B,Jun D, and c-Fos,Jun B,Jun D. As a result, c-Fos and c-Jun have the same strong inhibitory effect, Jun B and Jun D have the same inhibitory effect, c-Jun and c-Fos have the same weak inhibitory effect. The expression of these factors and the concentration of these factors in HIT cells were determined by the method of analysis and identification of the increase in the expression of these factors in culture medium. Jun B, Jun D,Jun D. C-Jun is the most important factor in the inhibition of gene expression.