甲状腺組織特異的転写調節因子の作用機構の研究

甲状腺组织特异性转录调节因子作用机制的研究

• 批准号: 06770804
• 负责人: 神部 福司
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770804/
• 关键词: 甲状腺; サイログロブリン; TTF-1; Pax-8; 甲状腺刺激ホルモン; インスリン; 組織特異的転写調節因子; DNA結合活性

甲状腺組織特異的転写調節因子として同定されたTTF-1、Pax-8はそれぞれhomeobox遺伝子群、paired box遺伝子群に属するDNA結合蛋白であり、甲状腺組織特異的蛋白の1つであるサイログロブリン(TG)遺伝子の転写調節領域に結合することが知られている。甲状腺刺激ホルモン(TSH)およびインスリンによるTG遺伝子発現調節にTTF-1、Pax-8がどのように関わっているのか検討した。初めに、PCR法により単離したラットTG遺伝子の転写調節領域(-178から-3)をレポーター遺伝子ルシフェラーゼの上流に組み込み、これをラット培養甲状腺細胞株FRTL-5に導入した。この細胞にTSHおよびインスリンを添加したところ、ルシフェラーゼ活性の上昇が認められた。また、これらのホルモンにより内因性のTGmRNAも増加し、単離した調節領域はTG遺伝子にTSH、インスリン応答性を賦与する領域であることが判明した。次に、これら転写因子のTG遺伝子調節領域DNAへの結合活性をelectrophoretic mobility shift assay法を用いて検討した。その結果、TSHおよびインスリン添加により、FRTL-5細胞のTTF-1、Pax-8の結合活性は単位細胞当たりで増加した。しかしながら、FRTL-5細胞のTTF-1、Pax-8 mRNA量はTSH、インスリンで変化がなかった。以上の結果から、TSH、インスリンによるTG遺伝子の転写活性の増加にTTF-1、Pax-8の転写調節領域への結合の増加が重要であることが示唆された。またこれら甲状腺組織特異的転写調節因子の結合活性の増加は翻訳後の蛋白の修飾によることが示唆された。

The thyroid tissue-specific 転 writing regulatory factor と <s:1> て isopies されたTTF-1, Pax-8 <s:1> それぞれhomeobox 伝 subgroup and paired Box heritage 伝 subgroup に genus す る DNA binding protein で あ り, 1 thyroid tissue specific protein の つ で あ る サ イ ロ グ ロ ブ リ ン (TG) heritage 伝 son の planning, regulating field に combining す る こ と が know ら れ て い る. Thyroid stimulating ホ ル モ ン (TSH) お よ び イ ン ス リ ン に よ る TG heritage 伝 son 発 now adjust に, Pax the vera.ttf - 1-8 が ど の よ う に masato わ っ て い る の か beg し 検 た. Early め に, PCR method に よ り 単 from し た ラ ッ ト TG heritage 伝 son の planning, regulating field (178 か ら - 3) を レ ポ ー タ ー posthumous son 伝 ル シ フ ェ ラ ー ゼ の upper に group み 込 み, こ れ を ラ ッ ト develop thyroid cell lines FRTL - 5 に import し た. こ の に TSH cells お よ び イ ン ス リ ン を add し た と こ ろ, ル シ フ ェ ラ ー ゼ active の rise が recognize め ら れ た. ま た, こ れ ら の ホ ル モ ン に よ り endogenous の TGmRNA も raised plus し, 単 し た adjust field は TG heritage 伝 に TSH, イ ン ス リ ン 応 a を fu and す る field で あ る こ と が.at し た. The に and を れら転 write the factor <s:1> TG residual 伝 to regulate the domain DNAへ <s:1> binding activity をelectrophoretic mobility shift assay を use を て検 to obtain the た. そ の results, TSH お よ び イ ン ス リ ン add に よ り, FRTL - 5 cells の, Pax the vera.ttf - 1-8 の binding activity は 単 a cell when た り で raised plus し た. し か し な が ら, FRTL - 5 cells の, Pax the vera.ttf - 1-8 mRNA は TSH, イ ン ス リ ン で variations change が な か っ た. の above results か ら, TSH, イ ン ス リ ン に よ る TG heritage 伝 son の planning の raised に requirement by writing activity, Pax the vera.ttf - 1-8 の planning, regulating field へ の combining の raised が important requirement by で あ る こ と が in stopping さ れ た. Youdaoplaceholder0 れら れら thyroid tissie-specific 転 writing regulatory factor <e:1> binding activity <e:1> increases <s:1> after 訳 transformation <s:1> protein <s:1> modification による とが とが とが indicates された.

项目成果

神部 福司: "Paired domain遺伝子に属するPax-8 mRNAのラット胎盤における検出" 環境医学研究所年報. 45. 159-160 (1994)

Fukuji Kambe：“大鼠胎盘中属于配对结构域基因的 Pax-8 mRNA 的检测”环境医学研究所年鉴 45. 159-160 (1994)。

宮崎 高志: "ラット メサンギウム細胞はPax-8遺伝子を発現している" 環境医学研究所年報. 46. (1995)

Takashi Miyazaki：“大鼠系膜细胞表达 Pax-8 基因”环境医学研究所年度报告 46。（1995）

神部 福司: "転写調節因子TTF1,Pax8はサイログロブリン遺伝子プロモーターに結合する" 環境医学研究所年報. 46. (1995)

Fukuji Kambe：“转录调节因子 TTF1 和 Pax8 与甲状腺球蛋白基因启动子结合”环境医学研究所年鉴 46。（1995 年）

F.Kambe: "Involvement of thyroid-specific transcription factors in normone-and serum-dependent regulation of the thyroglobulin gene expression in FRTL-5 cells." Thyroid. 4. S50- (1994)

F.Kambe：“甲状腺特异性转录因子参与 FRTL-5 细胞中甲状腺球蛋白基因表达的正常和血清依赖性调节。”

神部 福司: "培養甲状腺細胞株(FRTL-5細胞)における血清、TSHおよびインスリン刺激によるサイログロブリン(TG)プロモーター活性とTG mRNAの変動" 環境医学研究所年報. 45. 156-158 (1994)

Fukuji Kambe：“培养的甲状腺细胞系（FRTL-5 细胞）中血清、TSH 和胰岛素刺激引起的甲状腺球蛋白 (TG) 启动子活性和 TG mRNA 的变化”环境医学研究所年鉴 45. 156-158 (1994)。