男性不妊症における精漿プロテインCインヒビター発現低下の意義の解明

阐明精浆蛋白 C 抑制剂表达减少在男性不育症中的意义

• 批准号: 06771261
• 负责人: 林 辰弥
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Mie University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06771261/
• 关键词: プロテインCインヒビター; 活性化プロテインC; セリンプロテアーゼインヒビター; 男性不妊症; 受精; 発現調節領域

プロテインCインヒビター(PCI)は血液凝固制御因子の活性化プロテインC(APC)に特異的な血漿阻害因子で、α1アンチトリプシンなどと相同な構造を有する血漿セリンプロテアーゼインヒビター(SERPIN)ファミリー蛋白質の1つである。また最近では、PCIは精漿中に血漿中の約40倍も高濃度に依存し、男性不妊症患者精漿中では著しく低下していること、また精子の尖体にも存在し、卵との受精に関わっていることが示唆されいる。本年度は、PCI遺伝子の発現調節機序を明らかにするため、ヒトPCI遺伝子の発現調節に関与する遺伝子の5'上流領域(約1.6kb)を単離し、その構造解析を行うとともに、その発現調節領域について検討した。その結果、PCI遺伝子の5'上流にはSP1、AP2、GATA、HNF、C/EBPなどの種々の転写因子が結合するコンセンサス配列が存在することが明らかになった。さらに、PCI遺伝子の5'上流のフランキング領域を種々の大きさに欠落させた遺伝子DNAをエクソヌクレアーゼIIIを用いて作製し、ルシフェラーゼ(Luc)をレポーター遺伝子としてPCIを発現する肝癌細胞であるHepG2における発現調節領域について検討した結果、その肝臓における主要な転写促進活性はSP1および2個のAP2結合部位を含む領域に存在し、さらにPCI遺伝子の上流には少なくとも1個のサイレンサー領域が存在することが明らかになった。現在、このSP1および2個のAP2結合部位を含む領域の肝臓でのPCI発現におけるプロモーターあるいはエンハンサーとしての重要性についてさらに詳細に検討するとともに生殖臓器における転写調節領域について解析を行っている。

The plasma inhibitor C (PCI) is specific to the activation of blood coagulation control factors and has the same structure as the plasma inhibitor C(APC). The plasma inhibitor C(APC) has the same structure as the plasma inhibitor C (SERPIN). Recently, PCI has increased the concentration of sperm in seminal plasma by about 40 times. In men with infertility, the sperm concentration in seminal plasma is low, and the sperm concentration in sperm is low. This year, the PCI gene expression regulation mechanism was clarified, and the PCI gene expression regulation related to the 5'upstream region (about 1.6 kb) of the PCI gene expression regulation was discussed. As a result, the 5'upstream of PCI vector is SP1, AP2, GATA, HNF, C/EBP, and the seed writing factors are combined to form a set of parameters. In addition, the 5'upstream of PCI gene was found in the regulatory domain of HepG2, and the main promoter activity SP1 and two AP2 binding sites were found in the regulatory domain of HepG2. The upper stream of PCI is less than one page. Now, the SP1 and 2 AP2 binding sites are included in the analysis of PCI occurrence in the liver region of the genitals.

项目成果

Hayashi,T.Nishioka,J.,Suzuki,K.,et al.: "Protein S Tokushima:abnormal molecule with a substitution of Glu for Lys-155 in the second epidermal growth factor -like domain of protein S." Blood. 83. 683-690 (1994)

Hayashi,T.Nishioka,J.,Suzuki,K.,et al.：“蛋白质 S 德岛：蛋白质 S 的第二个表皮生长因子样结构域中的 Lys-155 被 Glu 取代的异常分子。”

Nadase,T.,Wada H.,Hayashi,T.,et al.: "Increased activated protein C-protein C inhibitor complex level in patients positive for lupus anticoagulant." Blood Coag.Fibr.5. 173-177 (1994)

Nadase,T.、Wada H.、Hayashi,T.等人：“狼疮抗凝剂阳性患者的活化蛋白 C-蛋白 C 抑制剂复合物水平升高。”

Ohiwa, M., Hayashi, T., Suzuki, K., et al.: "Factor VII Mie: homozygous asymptomatic type I deficiency caused by an amino acid substitution of His(CAC)for Arg(247)(CGC)in the catalytic domain." Thromb. Haemostas.71. 773-777 (1994)

Ohiwa, M.、Hayashi, T.、Suzuki, K. 等人：“因子 VII Mie：由 His(CAC) 取代 Arg(247)(CGC) 引起的纯合无症状 I 型缺陷

Minamikawa,K.,Wada,H.,Hayashi,T.,et al.: "Increased activated protein C-protein C inhibitor complex levels in patients with pulmonary embolism." Thromb.Haemostas.71. 192-194 (1994)

Minamikawa,K.、Wada,H.、Hayashi,T.等人：“肺栓塞患者中活化蛋白 C-蛋白 C 抑制剂复合物水平升高。”

Mizutani,H.,Hayashi,T.,Suzuki,K.,et al.: "Functional and immunoreactive thrombomodulin expressed by keratinocytes." J.Invest.Dermatol.103. 825-828 (1994)

Mizutani,H.、Hayashi,T.、Suzuki,K.等人：“角质形成细胞表达的功能性和免疫反应性血栓调节蛋白。”