プロテインCインヒビター遺伝子の組織特異的発現機構の研究-生殖系細胞および巨核球細胞における発現調節機構について-

Protein C抑制基因组织特异性表达机制研究 - 生殖细胞和巨核细胞表达调控机制 -

• 批准号: 08780557
• 负责人: 林 辰弥
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Mie University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08780557/
• 关键词: プロテインCインヒビター; プロテインC; シスエレメント; トランス因子

プロテインCインヒビター(PCI)は血液凝固制御因子の活性化プロテインC(APC)に特異的な血漿阻害因子で、α1アンチトリプシンなどと相同な構造を有する血漿セリンプロテアーゼインヒビター(SERPIN)ファミリー蛋白質の1つである。また、PCIは精漿中に血漿中の約40倍も高濃度に存在し、男性不妊症患者精漿中で著はしく低下していること、また精子の尖体にも存在し、卵との受精に関わっていることが示唆されている。また最近では、血小板にもPCIが存在し、PCIは血小板上でより効果的にAPCを阻害することが明らかになっている。過去2年間の本奨励研究の補助のもと、ヒトPCI遺伝子の5'上流領域(約1.6kb)中の肝における主要な転写調節領域としては、Sp1結合部位がプロモーター領域として、Sp1結合部位より上流側のAP2結合部位がエンハンサーとして、下流側のAP2結合部位がサイレンサーとして重要であることを明らかにしてきた。本年度は、この研究を更に発展させ、肝でのPCI遺伝子発現に関与するトランス因子に関して検討を行った。その結果、プロモーター領域であるSp1結合部位にはSp1蛋白質が結合すること、またエンハンサー領域である上流のAP2結合部位にはAP2蛋白質が結合すること、下流のAP2結合部位にはAP2様の蛋白質が結合することにより、それぞれPCIの発現を正あるいは負に調節していることを明らかにし、これらの核蛋白質がPCIの肝での発現を調節していることを明らかにした。現在、PCIを発現する生殖臓器由来の株化細胞を検索するとともに、腎臓由来の株化細胞および巨核球細胞において同様の解析を行い、PCI遺伝子上の組織特異的発現調節領域の同定を試みるとともに、その領域に結合し転写を調節する組織特異的トランス因子に関しても解析を行っている。

プ ロ テ イ ン C イ ン ヒ ビ タ ー (PCI) は blood clotting suppression factor の activeness プ ロ テ イ ン C (APC) に specific な plasma resistance against factor で, alpha 1 ア ン チ ト リ プ シ ン な ど と を な structure have same す る plasma セ リ ン プ ロ テ ア ー ゼ イ ン ヒ ビ タ ー (SERPIN) フ ァ ミ リ ー protein の 1 つ で あ る. ま た, PCI は in seminal plasma に の about 40 times も high concentrations in plasma に し, male sufferer not stretch marks in the seminal plasma で the は し く low し て い る こ と, ま た sperm の tip body に も し, egg と の fertilization に masato わ っ て い る こ と が in stopping さ れ て い る. ま た recently で は, platelet に も PCI が し, PCI は on platelet で よ り unseen fruit に APC を resistance against す る こ と が Ming ら か に な っ て い る. の the rewards in the past 2 years study の grant の も と, ヒ ト PCI heritage 伝 son の 5 'upstream areas (about 1.6 KB) の liver に お け る main な planning, regulating field と し て は, Sp1 binding site が プ ロ モ ー タ ー field と し て and Sp1 combined with よ り upper side の AP2 combining site が エ ン ハ ン サ ー と し て, nasty side の AP2 Combining site が サ イ レ ン サ ー と し て important で あ る こ と を Ming ら か に し て き た. This year は, こ の を more に 発 exhibition さ せ, liver で の PCI heritage 伝 son 発 now に masato and す る ト ラ ン ス factor に masato し て 検 line for を っ た. そ の results, プ ロ モ ー タ ー field で あ る Sp1 binding site に は Sp1 protein が combining す る こ と, ま た エ ン ハ ン サ ー field で あ る upper の AP2 combining site に は AP2 proteins が combining す る こ と, obscene の AP2 combining site に は AP2 others の protein が combining す る こ と に よ り, そ れ ぞ れ PCI の 発 を now Is あ る い は negative に adjust し て い る こ と を Ming ら か に し, こ れ ら の nuclear protein が PCI の liver で の 発 を adjust now し て い る こ と を Ming ら か に し た. Now, PCI を 発 now す る reproductive viscera origin の strain change cell を 検 cable す る と と も に, crucial renal origin の plant cells お よ び giant bulge cells に お い て with others in line analytical を の い, traces of PCI in の 伝 tissue specific 発 の is adjusting field with constant を try み る と と も に, そ の fields に し planning write を adjust す る tissue specific ト ラ ン に ス factors Related to て る analysis of を lines って る る.

项目成果

Ido,M.,Hayashi,T.,Nishioka,J.,et al.: "Prenatal diagnosis of compound heterozygous deficiency of protein C by direct detection of the mutation sites." Thromb.Haemostas.76. 277-278 (1996)

Ido,M.、Hayashi,T.、Nishioka,J. 等人：“通过直接检测突变位点对 C 蛋白复合杂合缺陷进行产前诊断。”

Nishioka,J.,Ido,M.,Hayashi,T.and Suzuki,K.: "The Gla^<26> residue of protein C is required for the binding of protein C to thrombomodulin and endothelial cell protein C receptor,but not to protein S and factor Va." Thromb.Haemostas.75. 275-282 (1996)

Nishioka,J.、Ido,M.、Hayashi,T. 和 Suzuki,K.：“蛋白 C 的 Gla^26> 残基是蛋白 C 与血栓调节蛋白和内皮细胞蛋白 C 受体结合所必需的，但不是

Hayashi,T.,Nishioka,J.and Suzuki,K.: "Molecular mechanism of dysfunctional protein S Tokushima(Lys155-Glu)for the regulation of the blood coagulation system." Biochim.Biophys.Acta. 1272. 159-167 (1995)

Hayashi,T.、Nishioka,J. 和 Suzuki,K.：“功能失调蛋白 S Tokushima（Lys155-Glu）调节凝血系统的分子机制。”

Mizutani,H.,Ohyanagi,S.,Hayashi,T.,et al.: "Functional thrombomodulin expression epithelial skin tumours as a differentiation marker for suprabasal keratinocytes." Brit.J.Dermatol.135. 187-193 (1996)

Mizutani,H.,Ohyanagi,S.,Hayashi,T.,et al.：“功能性血栓调节蛋白表达上皮皮肤肿瘤作为基底上角质形成细胞的分化标志物。”

Mizutani,H.,Hayashi,T.,Nouchi.N.,et al.: "Increased endothelial and epidermal thrombomodulin expression and plasma thrombomodulin level in progressive systemic sclerosis." Acta Med.Okayama. 50. 293-297 (1996)

Mizutani,H.、Hayashi,T.、Nouchi.N.等人：“进行性系统性硬化症中内皮和表皮血栓调节蛋白表达以及血浆血栓调节蛋白水平增加。”