電気生理学的アプローチによる子宮平滑筋ギャップ結合の透過性調節機構の解明(子宮平滑筋におけるβ刺激剤の電気的細胞間結合に及ぼす影響)

利用电生理学方法阐明子宫平滑肌间隙连接的通透性调节机制（β-激动剂对子宫平滑肌细胞间电耦合的影响）

• 批准号: 06771316
• 负责人: 酒井 伸嘉
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Yamagata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06771316/
• 关键词: 子宮平滑筋; ギャップ結合; 電気的細胞間結合; β刺激剤; 電気生理

成熟ラット(8〜10週齢)を開腹後子宮を摘出し、平滑筋組織を酵素処理して子宮平滑筋細胞を単離した。最初単離した筋細胞は1〜2週間の培養にて単層に合流した。この単層の筋細胞を用いて、細胞外液を電気生理学用の標準煤液(Tyroid solution)に交換し、細胞膜に微小ガラス電極でホールセルクランプを行った。そして、電気刺激装置により細胞膜の興奮しない過分極に静止電位を変化させ、その結果生じる細胞内向き電流からオームの法則に従ってホールセルクランプ用増幅器で細胞入力抵抗(Ro)を測定した。Roは標準煤液にβ刺激剤であるisoproterenolや細胞内cAMP濃度を上昇させることが知られているdibutyryl cAMP、forskolinの添加によりいずれも有意に上昇した。さらに、細胞外液をTyroid solutionにて洗浄後Roを測定すると薬剤投与前のそれぞれの値にほぼ可逆的に戻った。これらの薬剤によるRoの上昇は子宮筋細胞間の電気的結合が可逆的に減少したことを示しており、ギャップ結合の透過性が抑制されたことを示唆している。以上より、臨床的に子宮収縮抑制剤として応用されているβ刺激剤の幾つか(terbutalin,ritodrine)にも、同様の機序が子宮収縮の抑制に重要に関与していることが推測された。

Mature ラット(8-10 weeks 齢)を after laparotomy, the uterus を was extracted, and the smooth tendon tissue を was treated with enzymes. The smooth tendon cells of the uterus を単 were removed from the uterus た. Initially, 単 is 1 to 2 weeks away from the <s:1> た tendon cells た, and the <s:1> culture にて単 layer に converges with <s:1> た. こ の 単 layer の muscle cells を using い て 気 physiology, extracellular fluid を electricity use の of standard coal liquid (Tyroid solution) に exchange し, cell membrane に tiny ガ ラ ス electrode で ホ ー ル セ ル ク ラ ン プ を line っ た. そ し て, electricity 気 stimulation device に よ り membrane の excited し な い too extremely に static potential を variations change さ せ, そ の result born じ る hyperconcentrated き current か ら オ ー ム の law に 従 っ て ホ ー ル セ ル ク ラ ン プ with good picture editor で cells into force determination of resistance (Ro) を し た. Ro は に beta of standard coal liquid stimulant で あ る isoproterenol や intracellular concentration cAMP を rise さ せ る こ と が know ら れ て い る dibutyryl cAMP, forskolin の add に よ り い ず れ も intentionally に rise し た. さ ら に, extracellular fluid を Tyroid solution に て incorporated after determination of Ro を す る と 薬 tonic cast with former の そ れ ぞ れ の numerical に ほ ぼ reversible に 戻 っ た. こ れ ら の 薬 tonic に よ る Ro の rise は の between uterine muscle cells in the combination of electric 気 が reversible に reduce し た こ と を shown し て お り, ギ ャ ッ プ combining の permeability が inhibit さ れ た こ と を in stopping し て い る. Above よ り, clinical に 収 shrinkage inhibit uterine tonic と し て 応 with さ れ て い る beta stimulant の several つ か (terbutalin, ritodrine) に も, with others in の machine sequence が 収 shrinkage の inhibit uterine に important に masato and し て い る こ と が speculation さ れ た.