電気生理学的手法によるヒト子宮平滑筋ギャップ結合の透過性調節機構の解明(ヒト子宮平滑筋における収縮調節薬物の電気的細胞間結合に及ぼす影響)

利用电生理技术阐明人子宫平滑肌间隙连接的通透性调节机制(收缩调节药物对人子宫平滑肌细胞间电耦合的影响)

基本信息

  • 批准号:
    07771347
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 0.64万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
  • 财政年份:
    1995
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1995 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

日本産科婦人科学会倫理規定に準じて十分なinformed consent後、帝王切開施行妊婦より切開部子宮筋組織片を採取し、酵素処理にて子宮平滑筋細胞を単離した。単離した筋細胞は1〜2週間の培養にて単層に合流した。この単層の筋細胞の細胞外液を電気生理学用の標準媒液(Tyroid solution)に交換し、細胞膜に微小ガラス電極でホールセルクランプを行い、電気刺激装置により細胞膜の興奮しない過分極に静止電位を変化させ、その結果生じる細胞内向き電流からオームの法則に従ってホールセルクランプ用増幅器から細胞入力抵抗(Ro)の測定を試みた。集められたヒト子宮筋検体数の限界やヒト子宮平滑筋細胞におけるホールセルクランプ法の難易点から統計的な確証は十分得られなかったが、Roは標準媒液にβ刺激剤であるritodrineを添加することにより上昇する傾向があり、薬剤が子宮筋細胞間の電気的結合を減少させることが示唆された。すなわち、臨床的に子宮収縮抑制剤として応用されているβ刺激剤が、機能的細胞間結合の主役であるギャップ結合の透過性を変化させ、その結果、子宮収縮の抑制に重要に関与していることが推測された。今後、検体数を増加し、また、ヒト子宮平滑筋細胞におけるホールセルクランプ法を向上させ、子宮収縮促進剤を含めた他の薬剤においても同様の検討をする予定である。
The Japanese Society of Obstetrics and Gynecology has established ethical regulations for the preparation of uterine smooth muscle tissue samples after an incision and enzyme treatment. The cells were cultured for 1 to 2 weeks and then merged into single layers. The standard medium (Tyroid solution) for electrophysiology of extracellular fluid of muscle cells in different layers is used for exchange, microelectrode of cell membrane is used for electrode selection, electrostimulation device is used for excitation of cell membrane, static potential of cell membrane is changed, and the result is generated. The principle of intracellular current is used for measurement of cell input force resistance (Ro). The number of uterine muscle cells in the uterus is limited by the number of smooth muscle cells in the uterus. The statistical analysis shows that the number of smooth muscle cells in the uterus increases with the increase of beta stimulants in the standard medium. The number of smooth muscle cells in the uterus decreases with the increase of beta stimulants. The role of beta stimulators in the inhibition of uterine contractions in clinical practice and the role of functional cell-to-cell binding in the transmission of uterine contractions are presumed to be important in the inhibition of uterine contractions. In the future, the number of uterine smooth muscle cells will increase, and the number of uterine contractions will increase.

项目成果

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  • 资助金额:
    $ 0.64万
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