卵胞液・透明帯の精子先体反応誘起におけるカルパインの役割に関する研究

卵泡液和透明带中钙蛋白酶诱导精子顶体反应的研究

• 批准号: 06771337
• 负责人: 戸田 稔子
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Tottori University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06771337/
• 关键词: 精子; カルパイン; 不妊症; 受精能

[目的]精子の受精機能に不可欠な先体反応にはカルシウムイオンの存在が必要であるが、細胞内のカルシウムシグナルがどのようにして精子細胞機能の発現と結び付くかは不明である。カルシウム情報伝達機構のひとつであるカルパインが先体反応に関与することが示されていることから、本研究では精子カルパイン活性測定が精子機能の指標として有用であるかどうか検討した。[方法]妊孕性の確認された男性と男性不妊症患者、体外受精施行患者の精子カルパイン活性を測定し、健丈男性と男性不妊症患者および体外受精患者の受精症例と非受精症例の間で精子カルパイン活性に差があるかどうか検討した。精子カルパイン活性測定法は以下のとうり行った。精子を精漿から完全に分離し、精子蛋白50μgを用いてpH7.4、カルシウムイオン4mMの条件下で、FITC標識カゼインを基質としカルパインのエンドペプチダーゼ活性により生じたトリクロロ酢酸可溶性のペプチドフラグメントを定量した。また精子カルパイン活性と他の精子機能検査結果との関係も検討した。[成績]健丈男性と男性不妊症患者および体外受精症例の受精症例と非受精症例の間の精子カルパイン活性の比較では、健丈男性および受精症例が有意に高値を示した。また、精子濃度、精子運動率、形態正常精子率、精子アクロシン活性、hypoosmotoc swelling test の結果と精子カルパイン活性との間には正の相関がみられた。精子カルパイン活性の正常値を健丈男性の測定値の平均±2SD と規定すると、体外受精の結果のpositive/negative predictive valueは、それぞれ65%、78%であった。[結論]精子カルパイン活性測定は精子受精機能を反映することが示され、新しい精子機能検査として有用であることが示唆された。現在、先体反応時の精子カルパイン活性の変化について検討中である。

[Purpose] The fertilization function of sperm is indispensable and the existence of precursor reaction is necessary and fine. Intracellular sperm cell function is not clear yet.カルシウムInformation Agency のひとつであるカルパインが First Body Rebellion Seki and することが Show されていることから、This study is useful for measuring the activity of sperm and sperm function and using it as an indicator. [Method] Confirmation of pregnancy, measurement of sperm activity in men with male infertility, patients undergoing in vitro fertilization, and measurement of healthy men Male infertility patients, in vitro fertilization patients, fertilization cases and non-fertilization cases, sperm activity, sperm activity, difference, and low sperm count. The sperm activity test method is as follows. Sperm is completely separated from seminal plasma, 50 μg of sperm protein is used under the conditions of pH 7.4, カルシウムイオン 4mM, FITC mark is usedインを matrix としカルパインのエンドペプチダーゼActive により生じたトリクロロ颢 acid soluble のペプチドフラグメントをquantitativeした.またSperm カルパインactivity と His のSperm function 検CHECK RESULTS との Relationship も検 Discussion した. [Results] Comparison of sperm activity between healthy men and male infertility patients, cases of in vitro fertilization, and non-fertilization cases, and comparison of healthy men with fertilization cases.また, sperm concentration, sperm motility rate, morphologically normal sperm rate, sperm アクロシン activity, hypoosmotoc swelling test の results と sperm カルパイン activity との间 にはpositive の correlation がみられた. The activity of sperm is normal and the average value of healthy men is ±2SD, and the results of in vitro fertilization are positive/negative predictive value, 65%, and 78%. [Conclusion] The determination of sperm activity, sperm fertilization function, and new sperm function are useful. Now, when the first body reacts, the activity of the sperm in the body is changed, and the sperm is in the middle.

项目成果

P.M.Zavos,et.al.: "Purification and characterization of a cytosolic calcium-dependent neutral protease(calpain)from human spermatozoa" Hum Reprod. 9(Supple.4). 46-46 (1994)

P.M.Zavos 等人：“人精子中胞质钙依赖性中性蛋白酶（钙蛋白酶）的纯化和表征”Hum Reprod。

N.Sofikitis,et.al.: "Studies on Ca^<2+>-dependent neutral protease(calpain)-like activity in human sperm,a novel sperm function test" Fertil Steril. 63. S197-S198 (1994)

N.Sofikitis 等人：“人类精子中 Ca^2 依赖性中性蛋白酶（钙蛋白酶）样活性的研究，一种新型精子功能测试”Fertil Steril。