IFN-γ,IL-4,DEXによる歯肉線維芽細胞におけるIL-1産生抑制機構の解明

阐明 IFN-γ、IL-4 和 DEX 抑制牙龈成纤维细胞产生 IL-1 的机制

• 批准号: 06771745
• 负责人: 宮澤 康
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Showa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06771745/
• 关键词: 抗炎症性サイトカイン; サイトカイン産生; ヒト歯肉線維芽細胞

歯周組織構成細胞である歯肉線維芽細胞(HGFs)はそれ自身、歯周炎における炎症の波及や進展に関与するであろういくつかの因子やサイトカインを産生する。その中でも特にIL-1α,IL-6産生に及ぼす制御機構を明らかにするために抗炎症性サイトカイン(IL-4,IFN-γ)、ダルココルチコイド(Dexamethasone)による影響を検討した。健康な歯周組織より歯肉片を採取し、継代培養後4〜6代目のHGFsを24穴プレートで6日間培養し、その後ヒト・リコンビナントIFN-γ(rhIFN-γ:0.1〜10000U/ml),rhIL-4(0.01〜10ng/ml)でプライミング刺激(前刺激)、未刺激の条件下で24時間培養し、rhIL-1βの単独添加およびrhIL-4,rhIFN-γとの同時刺激でさらに24時間培養した。また7日目にDexamethasoneとrhIL-1β同時刺激により24時間培養した。その後、各々の培養上清中のIL-6量および細胞画分中のIL-1α量をELISA法にて定量した。その結果、rhIL-1βによるIL-1α産生誘導はrhIFN-γ(1000U/ml)のプライミング刺激により増強したが、同時刺激の条件下では産生量にほとんど変化は見られなかった。これに対しrhIL-1β刺激によるIL-6産生誘導はrhIFN-γの同時刺激でわずかに増強された。rhIL-4はプライミング刺激あるいはrhIL-1βとの同時刺激のいずれにおいてもIL-1α,IL-6の産生を抑制する傾向が見られた。またrhIL-1βによるIL-1α,IL-6の産生誘導はDexamethasoneとの同時刺激でほぼ完全に抑制された。以上より、歯肉炎症の進行や歯槽骨吸収に関与すると考えられるIL-1αやIL-6などのHGFsによる産生をTリンパ球由来のこれらサイトカインやグルココルチコイドが制御し、局所免疫応答を調整している可能性が示唆された。

Periodontal tissue constituent cells (HGFs) are themselves involved in inflammation and progression during periodontitis. To investigate the effects of IL-1α,IL-6 production and regulatory mechanisms on anti-inflammatory cytokines (IL-4,IFN-γ) and dexamethason. Healthy periodontal tissues were taken from the dental slices, and the HGFs of the fourth to sixth generation were cultured in 24 holes for 6 days. IFN-γ(rhIFN-γ:0.1 ~ 10,000 U/ml) and rhIL-4(0.01 ~ 10ng/ml) were added to the post-culture medium and stimulated (pre-stimulation) and cultured for 24 hours without stimulation. rhIL-1β was added separately and rhIL-4 was added, and rhIFN-γ was simultaneously stimulated and cultured for 24 hours. Dexamethasone and rhIL-1β were simultaneously stimulated for 7 days and cultured for 24 days. The amount of IL-6 in culture supernatant and IL-1α in cell culture were quantified by ELISA. The results showed that rhIL-1β induced IL-1α production and rhIFN-γ(1000U/ml) induced by rhIL-1 β increased under the condition of simultaneous stimulation. In response to rhIL-1β stimulation, IL-6 production was induced and rhIFN-γ was stimulated simultaneously. rhIL-4 has a tendency to inhibit IL-1α and IL-6 production in response to rhIL-1β and simultaneous stimulation. The induction of IL-1α and IL-6 by rhIL-1β was completely inhibited by Dexamethasone and simultaneous stimulation. The above results indicate that IL-1α and IL-6 are related to the development of dental inflammation and the generation of HGFs, and the possibility of regulation of local immune response is also discussed.