血管内皮細胞における機械受容チャネルの研究

血管内皮细胞机械敏感通道的研究

• 批准号: 06770029
• 负责人: 成瀬 恵治
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770029/
• 关键词: 機械受容チャネル; 機械刺激; 血管内皮細胞; パッチクランプ法; 共焦点レーザー顕微鏡

本研究によって下記の結果を得た。1・低浸透圧による機械刺激低浸透圧処理による機械刺激を期待する場合、細胞膜伸展の度合いを評価しなければならない。接着細胞において体積増加による細胞膜の伸展の度合いを定量するために膜に蛍光色素を取り込ませ標識しリアルタイム共焦点レーザー顕微鏡を用いて縦断層面の経時的変化(z-t)の観察をした。その結果、低浸透圧刺激による膜伸展の時間経過を定量的に測定することができた。また従来、浮遊細胞系で報告されている調節性体積減少を確認することができた。2・シリコン膜による機械刺激従来の方式では伸展刺激時に焦点面がずれ、振動が大きい等のデメリットがあり、顕微鏡観察・電気生理学的手法は困難であった。本研究では従来法に改良を加え伸展時に焦点面がずれたり振動が少ない装置を開発した。現在、1・2の方法を駆使して定量的に機械刺激を与え機械受容チャネルを活性化し、生じる電気生理学的現象をパッチクランプ法にて記録している。

The results of this study were recorded. 1. Mechanical stimulation at low osmotic pressure. Evaluation of the degree of cell membrane stretch. Then the cell volume increases, the cell membrane stretch is quantified, and the membrane pigment is selected to identify the confocal point. Microscopy is used to observe the time-dependent transformation (z-t) of the cell membrane. The results of this study include quantitative measurement of membrane elongation due to low osmotic pressure stimulation. The regulatory volume reduction reported by the phytoplankton cell line was confirmed. 2. The mechanical stimulation of the membrane is difficult to detect when the focal plane is exposed, the vibration is large, etc. In this study, we improved the method by increasing the focal plane vibration during stretching. Now, the 1.2 method allows quantitative mechanical stimulation and activation of mechanical receptors, and the phenomenon of biological electrical physiology to be recorded using the

项目成果

M.Sokabe.et al: "Stretch activated ion channels:Macroscopic vs.microscopic responses." Progr.Cell Res.(in press). (1995)

M.Sokabe.et al：“拉伸激活的离子通道：宏观反应与微观反应。”