血管内皮細胞の機械刺激受容応答機構の研究

血管内皮细胞力觉反应机制研究

• 批准号: 08770033
• 负责人: 成瀬 恵治
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08770033/
• 关键词: 機械受容; 細胞内CA; SAチャネル

本年度の研究目的は(1)細胞内カルシウムの空間的動態の解析(濃度上昇の空間的不均一性が生じるか否か)と(2)接着斑蛋白質チロシンリン酸化の空間的不均一性の解析を行い、血管内皮細胞における形態および細胞骨格の空間的不均一応答との関連を解明することにあった。結果(1)細胞内カルシウム空間的動態外液カルシウム濃度が100uMでは伸展刺激による形態変化が起こることを示しているが細胞内カルシウムを均一に上昇させる目的でionomycinを加え細胞内カルシウム濃度も100uMにした。これはFura2を用いたカルシウム蛍光測光にて確認している。細胞内カルシウム濃度をこのようにして均一に100uMにしたとき(かなり高い濃度で、伸展刺激によるカルシウム濃度上昇よりもはるかに高い濃度)でも伸展刺激により形態変化を惹起することができた。この実験結果は細胞内カルシウムの空間的分布に局所性がなくてもよいことを示唆している。しかし、細胞内カルシウムの上昇がないと形態変化は起こらないことから細胞内カルシウムの上昇は必要条件ではあるが十分条件ではない。現在、細胞内カルシウムイメージングを行い確認を行っている。(2)接着斑蛋白質チロシンリン酸化の空間的不均一性細胞に伸展刺激を与え固定後、抗リン酸化チロシン抗体にてチロシンリン酸化蛋白を検出した。我々の研究から接着斑蛋白が強くチロシンリン酸化を受けることを示している。今回免疫染色により、接着斑に一致して抗リン酸化チロシン抗体に染色される部位が認められた。面白いことにその部位は伸展方向とは垂直方向、すなわち細胞が伸びていく方向の接着斑に強く認められた。

This year の research purpose は (1) cell カ ル シ ウ ム の dynamic の parsing (concentration increased の space heterogeneity が raw じ る か no か) と (2) then spot protein チ ロ シ ン リ ン acidification の spatial heterogeneity sex の parsing に を い, vascular endothelial cells お け る form お よ び cells bone の spatial heterogeneity 応 answer と の masato even を interpret す る Youdaoplaceholder0 とにあった. Results (1) cell カ ル シ ウ ム space outside the dynamic fluid カ ル シ ウ ム concentration が 100 um で は stretch stimulus に よ る morphology variations が up こ る こ と を shown し て い る が intracellular カ ル シ ウ ム を uniform に rise さ せ る purpose で ionomycin を plus え intracellular カ ル シ ウ ム concentration も 100 um に し た. <s:1> れ れ Fura2を confirm <s:1> て る る る る る る シウム蛍 シウム蛍 シウム蛍 シウム蛍 light metering にて. Concentration of intracellular カ ル シ ウ ム を こ の よ う に し て uniform に 100 um に し た と き (か な で り い high concentration, stretch to stimulate に よ る カ ル シ ウ ム concentration rising よ り も は る か に い concentration) で も stretch stimulus に よ り morphology variations を provoked す る こ と が で き た. The <s:1> <s:1> experimental results show that the distribution of the カ シウム シウム シウム <e:1> <e:1> space within the cells is に localized がなくて <s:1> よ よ とを とを とを とを とを とを とを とを suggesting that the て て る る る る is る. し か し, intracellular カ ル シ ウ ム の rise が な い と morphology variations は up こ ら な い こ と か ら intracellular カ ル シ ウ ム の rise は necessary で は あ る が very conditions で は な い. Now, within the cell, there are カ, シウム, メ, メ, ジ, グを lines って confirming を lines って, る, る, る. (2) then spot protein チ ロ シ ン リ ン acidification の spatial heterogeneity に extend sex cells stimulate を resistance, and え fixed リ ン acidification チ ロ シ ン antibody に て チ ロ シ ン リ ン acidic protein を 検 out し た. I 々 の research か ら then strong spot protein が く チ ロ シ ン リ ン acidification を by け る こ と を shown し て い る. Today back to immune dyeing に よ り consistent, then spot に し て resistance リ ン acidification チ ロ シ に ン antibody staining さ れ が る parts recognition め ら れ た. Bai い こ と に そ の と は stretch directions and vertical direction, す は な わ ち cells が stretch び て い く strong direction の then spot に く recognize め ら れ た.

项目成果

曽我部正博、成瀬恵治、嶽本和久: "SAチャネルは細胞の機械センサーか?" 蛋白質・核酸・酵素. 41. 2-13 (1996)

Masahiro Sogabe、Keiji Naruse、Kazuhisa Takemoto：“SA 通道是细胞机械传感器吗？” 41. 2-13 (1996)

成瀬恵治、曽我部正博: "血管活性化-張力(tension)" In 細胞工学別冊「動脈硬化+高脂血症研究ストラテジー」(山田・佐藤監修)秀潤社. 90-94 (1996)

Keiji Naruse，Masahiro Sogabe：细胞工程特刊“动脉硬化+高脂血症研究策略”中的“血管激活-张力”（山田和佐藤编辑）Shujunsha 90-94（1996）。