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血管内皮細胞における機械受容チャネルの研究

血管内皮细胞机械敏感通道的研究

基本信息

批准号：
07770030
负责人：
成瀬恵治
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至 1996
项目状态：
已结题

项目摘要

血管内皮細胞は血管内では紡錘形を呈し、その長軸を血管軸に平行に向けて配向しているが、培養系ではこのような特徴的形態を示さない。前年度までの研究により周期的伸展刺激を与えることにより伸展方向に垂直な方向へ細胞が配向し、それが機械受容チャネルのブロッカーで阻害されることを確認した。本年度は機械的な刺激を与えたときの形態学的反応を特に、細胞骨格(actin)・細胞接着班(vinculin)に着目して解明をめざした。研究計画に従い、下記の成果を得た。細胞骨格関連蛋白質であるactin及びvinculinの精製を行い、かつ機能を失うことなく蛍光色素によりラベルすることができた。SDSーPAGEにて色素が蛋白と共有結合していることを確認した。マイクロインジェクションシステムを用いて、蛍光色素標識蛋白を細胞内へ導入した。数分後、細胞内においてストレスフアイバーに一致して蛍光像が得られた。これはストレスファイバーにactinが組み込まれたことを意味する。vinculinに関しては、弱いながらも接着班に一致して蛍光像が得られた。シリコン膜上に培養した細胞内へ注入後、周期的伸展刺激を与えながらストレスファイバーの経時的変化をSITカメラにて撮影しビデオに記録した。周期的伸展刺激によりストレスファイバーが変化していく様子を記録することが出来た。細胞接着班に関しては現在、解析中である。

Vascular endothelial cells are spindle shaped in the blood vessel, their long axis is parallel to the vascular axis, and their characteristic morphology is shown in culture. In the previous year, the study confirmed that the cell alignment in the vertical direction of extension was affected by mechanical stress. This year's mechanical stimulation and morphology of the reaction, cell skeleton (actin), cell adhesion class (vinculin) to solve the problem The results of the research project are recorded below. The purification and function of cytoskeleton associated proteins such as actin and vinculin are lost. SDS PAGE confirmed the binding of the pigment. The protein is introduced into the cells using a fluorescent dye. After a few minutes, the cells were filled with light. This is the first time that I've seen this. Vinculin is the only one who has the ability to make light. After intracellular injection, cyclic stretch stimulation and SIT changes were recorded. The periodic stretching stimulus is called "the first step" and "the second step" is called "the first step." The cells are then closed, and the analysis is ongoing.

项目成果

期刊论文数量（3）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

M,Sokabe: "Stretch activated ion channds:Macroscopic vs, microscopic lespinses" Prog,Cell,Res. (in press).

M，Sokabe：“拉伸激活离子通道：宏观与微观 lespinses”Prog，Cell，Res。

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

成瀬恵治: "Tension" 動脈硬化+高脂血症研究ストラテジー. (印刷中). (1996)

Keiji Naruse：“张力”动脉硬化+高脂血症研究策略（出版中）。

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

曽我部正博: "SAチャネルは細胞の機械センサか?" 蛋白質・核酸・酵素. 41. 2-13 (1996)

Masahiro Sogabe：“SA 通道是细胞机械传感器吗？” 41. 2-13 (1996)

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作者：
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通讯作者：
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通讯作者：
Yoshimoto Kenji Wada Hiroko Ohmae Etsuko Yoshizawa Nobuko Koizumi Kei Ogura Hiroyuki Suzuki Hiroaki Homma Shu Mimura Tetsuya Suzuki Norihiro Nasu Hatsuko Asano Yuko Goshima Satoshi Ueda Yukio