悪性固形腫瘍における顆粒球系コロニー刺激因子受容体の発現

粒细胞集落刺激因子受体在恶性实体瘤中的表达

基本信息

  • 批准号:
    06770136
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 0.58万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
  • 财政年份:
    1994
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1994 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

【目的・方法】腫瘍の産生する増殖因子が腫瘍細胞自身に作用し、増殖を刺激するというAutocrine機構は種々のin vitro実験系で提唱されてきたが、実際にin vivoの固形腫瘍でこの現象を明らかにした研究はない。本研究では、G-CSF産生腫瘍の増殖・悪性転化機構が腫瘍細胞より自律性に産生されるG-CSFのAutocrine機構によって説明でき得るかを考察することを目的とし、腫瘍細胞上のG-CSFRの発現を、RT-PCR法、in situ receptor binding法などの手法を用いて、遺伝子・蛋白レベルで検討することを目的とした。我々は既にヒトG^CSF産生ヌードマウス移植腫瘍株10株を樹立・同定済みであり、今回これら10株のヒトG-CSF産生ヌードマウス移植腫瘍株について、RT-PCR法を用いてG-CSF受容体(Granulocyte Colony-Stimulating Factor Receptor,G-CSFR)の産生・発現を検討した。G-CSFR遺伝子発現はG-CSF産生ヌードマウス移植腫瘍材料より精製・抽出したRNAを鋳型にし、G-CSFR遺伝子に特異的なプライマーを用いたRT-PCR法(Reverse Transcriptase-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)を行い、G-CSFR遺伝子の発現を検討した。【結果】RT-PCR法により胎盤及びヒト悪性リンパ腫由来細胞株(U937)を用いてG-CSFR遺伝子の発現が同定可能であることを確認した。in situ RT-PCR法によりG-CSFR遺伝子転写産物の同定を試みたが、腫瘍細胞上に直接G-CSFR遺伝子転写産物を確認・同定することはできなかった。そこで、G-CSFRの細胞表面上での発現を腫瘍材料組織切片に、蛍光標識G-CSFを用いたin situ receptor binding法を施し、免疫組織化学的に検討中である。また、G-CSF産生腫瘍を担癌させたヌードマウス固体に、既に作製済みの抗G-CSF抗体を投与し、抗G-CSF抗体投与による治療実験を行ったが、腫瘍の増殖速度の変化は起こらなかった。
Swollen sores purpose, method 】 【 の produce す る raised colonization factor が swollen sores cells themselves に し, raised colonization を stimulus す る と い う Autocrine institutions は kind 々 の in vitro be で 験 department to sing さ れ て き た が, be interstate に in vivo の solid shape swollen sores で こ の phenomenon を Ming ら か に し た research は な い. This study で は and g-csf swollen sores の rights, colonization 悪 sex, planning the agency が swollen sores cells よ り self-discipline に produce さ れ る g-csf の Autocrine institutions に よ っ て illustrate で き must る か を investigation す る こ と を purpose と し, swollen sores on cells の G - CSFR の 発 を now, rt-pcr method, in situ Receptor binding method な ど の gimmick を with い て, but 伝 son protein レ ベ ル で す 検 please る こ と を purpose と し た. ^ I 々 は both に ヒ ト G CSF produce ヌ ー ド マ ウ swollen sores ス transplant seedlings を 10 sets up, be 済 み で あ り, today back to こ れ ら 10 strains の ヒ ト g-csf produce ヌ ー ド マ ウ ス transplantation swollen sores strains に つ い て, rt-pcr method を い て g-csf let body (Granulocyte Colony-Stimulating Factor Receptor,G-CSFR) <s:1> produces · occurs を検 attacks た. G - CSFR posthumous son 伝 発 now は g-csf produce ヌ ー ド マ ウ swollen sores ス transplantation material よ り refined, drew し た RNA を type where に し, G - CSFR but 伝 に specific な プ ラ イ マ ー を with い た rt-pcr method (Reverse Transcriptase - Polymerase Chain Reaction: RT-PCR (を)を, G-CSFR (伝 offspring) 伝 occurrence を検 discussion た. 【 results 】 rt-pcr method に よ り placenta and び ヒ ト 悪 sex リ ン パ swollen origin cell lines (U937) を い て G - CSFR heritage 伝 son の 発 が now may be で あ る こ と を confirm し た. The in situ rt-pcr method に よ り G - CSFR heritage 伝 child product planning write の with fixed を try み た が, swollen sores on cells に direct G - CSFR heritage 伝 child product planning write を confirmed, with constant す る こ と は で き な か っ た. そ こ で, G - CSFR の cells on the surface of で の biopsy に 発 を now swollen sores materials, 蛍 light logo g-csf を with い た in situ receptor binding method を し shi, immunohistochemical に 検 beg in で あ る. ま た and g-csf swollen sores を bear carcinoma さ せ た ヌ ー ド マ ウ ス solid に, both に cropping 済 み の G - CSF antibody を cast and し resistance, resistance to cast and g-csf antibody に よ る treatment be 験 を line っ た が, swollen sores の raised colonization rate の variations change は up こ ら な か っ た.

项目成果

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  • 通讯作者:
    石川 義弘

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