クローン病の大腸炎症局所湿潤T細胞の抗原受容体β鎖可変領域遺伝子再構成の検討

克罗恩病结肠炎症局部浸润T细胞抗原受体β链可变区基因重排的检测

• 批准号: 06770387
• 负责人: 井上 詠
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770387/
• 关键词: クローン病; 大腸粘膜; 粘膜固有層内リンパ球; T細胞受容体

1.クローン病患者の回腸末端病変部および大腸病変部より上皮細胞間リンパ球(IEL)、粘膜固有層内リンパ球(LPL)を分離を試み、回腸末端病変部のIEL、大腸病変部のLPLの細胞株を樹立した。2.クローン病患者の回腸末端病変部のIELを28週から56週培養するとT細胞受容体のうちVβ5.2を有するT細胞が有意に増加していた。3.これらのVβ5.2陽性細胞を多く含むT細胞株は高γインターフェロン産生能とredirected cytotoxicity assayにおける高い細胞障害活性を有しており、局所の活性化したIELがγインターフェロンを介してマクロファージの集族、活性化をおこしていることが示唆された。4.super antigenとして知られている各種のStaphylococcal enterotoxin(SE)を分離直後のIELに添加し、^3H-Thymidin uptakeにより増殖活性を調べると、SEC1、SEDにより増殖活性が上昇することが示された。5.大腸病変部のLPLでVβ1〜Vβ20のプライマーを用いてRT-PCR法によりT細胞受容体のVβの偏りを検討すると、特定のVβに偏った発現は認められず、むしろ2〜3個のVβで発現が認められないほかはすべてのVβが発現していた。6.大腸病変部のLPLの細胞株よりLPLのT細胞クローンの作製を試みたが、今回の系ではクローン化に成功し得なかった。現在抗CD3交代などで刺激してLPLのT細胞クローンを作製中で、これを用いて各クローンでのVβの発現、および各種super antigenを用いた増殖能の検討とVβの発現との関連を検討中である。

1. Cell lines of terminal ileal disease and large intestinal disease were established by isolation of epithelial cell-derived globules (IEL) and lamina propria (LPL) from patients with terminal ileal disease. 2. The IEL of terminal ileum in patients with chronic disease was increased intentionally from 28 weeks to 56 weeks in culture, and T cell receptor Vβ5.2 was increased. 3. The T cell lines containing more Vβ5.2 positive cells were able to produce high levels of γ-ray and redirected cytotoxicity assay, and high levels of cell-barrier activity were observed in IEL γ-ray and activated cells. 4. Super antigen is known to increase the reproductive activity of various Staphylococcus enterotoxin(SE) after IEL addition, SEC1 and SED uptakes. 5. The expression of Vβ1 ~ Vβ20 in LPL of colorectal disease was studied by RT-PCR, and the expression of V β in specific Vβ receptors was identified. 6. LPL cell lines in the colon disease have been successfully transformed into LPL T cells. The present study is aimed at exploring the relationship between the development of V β and the use of various super antigens in the treatment of T cell proliferation induced by CD3.