C型肝炎ウイルスコア抗原特異的細胞障害性T細胞株の樹立と解析

丙型肝炎病毒核心抗原特异性细胞毒T细胞系的建立及分析

• 批准号: 06770383
• 负责人: 金子 隆志
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770383/
• 关键词: 慢性肝炎; C型肝炎ウイルス; T細胞受容体; 細胞障害性T細胞; 免疫学

本研究は、C型肝炎の免疫学的機序を解析するため、C型肝炎ウイルス(HCV)core抗原特異的細胞障害性T細胞株を樹立することを目的とした。C型肝炎ウイルスの81より100のアミノ酸を認識するHLA B-44拘束性のC型肝炎ウイルスcore抗原特異的細胞障害性T細胞株(CTL clone)を樹立した。樹立細胞株は、樹立の元となった細胞障害性T細胞ラインと同じくHLA B-44拘束性であり、C型肝炎ウイルスの81より100のアミノ酸を認識した。また、組換えHCV cioneワクシニアウイルス感染の細胞を認識し、内因性のHCV coreを認識することも確認された。このCTL coreを使用し、C型肝炎ウイルスの81より100のアミノ酸の内、どのアミノ酸を最小単位として認識するかの実験を行った。それぞれ、アミノ末端、カルボキシル末端より、次第に短くしたペプチドを合成し、これをHLA B-44をもつEB virus transformed B cellにパルスし、細胞障害活性を見た。その結果、C型肝炎ウイルスの88より96のアミノ酸を最小単位のエピトープとして認識することが判明した。この最小単位のエピトープはもとの81より100のアミノ酸より、より強く認識され、今後のより強いエピトープ部位として、細胞障害性Y細胞の誘導等に有用であった。この最小エピトープを様々な患者にて、そのシークエンスを解析したところ、1つの突然変異が見つかった。この変異ペプチドを合成し、それを標的とする細胞障害活性を見たところ、その細胞障害活性はもとのペプチドに対するものより、低下していることが観察された。従って、この変異は、細胞性免疫に対するウイルス側のエスケープ変異と考えられた。

The aim of this study was to elucidate the immunological mechanisms of hepatitis C and to establish cell-mediated T cell lines specific for hepatitis C virus (HCV)core antigen. Hepatitis C virus 81 to 100 years ago recognized HLA B-44 binding hepatitis C virus core antigen specific cytotoxic T cell line (CTL clone) was established. The establishment of cell lines, the establishment of cell damage T cells, the same HLA B-44 binding, hepatitis C virus 81, 100 and acid recognition HCV infection is recognized by HCV cells and by endogenous HCV core. The CTL core is used for hepatitis C, and 81 or 100 percent of the virus is used for hepatitis C. The minimum number of virus is used for hepatitis C. Open label, non-functional terminal,, and secondary short-term selection buttons were synthesized, which allowed HLA B-44 to be used in EB virus transformed B cells, and cell barrier activity was observed. The results showed that hepatitis C virus infection rate was 88%, 96%, and 96%. The minimum position is 81 °, 100 °, 10 The minimum number of patients, the number of patients, the number of patients The cell damage activity of the target cell was detected. The difference between the two is that the cellular immunity is different.

项目成果

Hiroto,Kita: "A helper T-cell antigen enhances generation of hepatitis C virus-specific cytotoxic T lymphocytes in vitro" Journal of Medical Virology. (発表予定). (1995)

Hiroto, Kita：“辅助 T 细胞抗原在体外增强丙型肝炎病毒特异性细胞毒性 T 淋巴细胞的产生”《医学病毒学杂志》（即将出版）。