骨髄性プロトポルフィリン症患者の遺伝子解析、DNA診断と患者変異遺伝子の発現

髓性原卟啉症患者的遗传分析、DNA诊断及患者突变基因的表达

• 批准号: 06770410
• 负责人: 谷 和宏
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Kansai Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770410/
• 关键词: フェロケラターゼ遺伝子; 骨髄性プロトポルフィリン症; DNA診断

単離されたヒトフェロケラターゼcDNAおよびゲノムDNAを用いて、致命的な重症肝不全を合併した日本人骨髄性プロトポルフィリン症(EPP)患者とその家族の遺伝子解析およびDNA診断を試み、この患者のフェロケラターゼ遺伝子に全く新しいタイプの点変異があることを明らかにした。(1)患者から得られたリンパ球をEBVでトランスフォームし、これらの細胞からcDNAを調整した。PCR法によりフェロケラターゼをコードした部分を増幅、単離し、電気泳動法によりフェロケラターゼcDNA長を検索したところ、正常なサイズのものとこれよりやや小さなサイズの2つのフェロケラターゼcDNAが確認された。異常な長さのcDNAクローンの塩基配列を決定したところ、フェロケラターゼ遺伝子のエクソン9が欠落していた。さらに患者のゲノムDNAの解析により、対立遺伝子の異常とイントロン9のdonor siteの最初の位置にG→Aの点突然変異が明らかにされた。この点突然変異はこれまでに報告のない新しいタイプのものであった。(2)患者における以上のデータに基づいて、患者家族のフェロケラターゼ遺伝子を解析し、さらにDNA診断を試みた。対立遺伝子に特異的なオリゴヌクレオチドを用いたハイブリダイゼイション(Allele-specific oligonucleotide hybridization)法により患者家族のフェロケラターゼ遺伝子を調査したところ、患者の父と患者第1子及び長兄の第1,2子に患者と全く同一の遺伝子異常(点突然変異)が発見された。さらに患者の長兄(EPPにより死亡)と次兄は変異遺伝子のキャリアーであると推測された。これらの結果により、この家族におけるEPPは常染色体優性の遺伝様式であると結論づけた。本研究により骨髄性プロトポルフィリン症のDNA診断が可能になった。

The patients with fatal severe hepatic insufficiency (EPP), patients with severe liver insufficiency (EPP), patients with severe liver disease (EPP), patients with severe hepatic insufficiency (SARS), patients with severe liver disease (SARS), patients with severe hepatic insufficiency (SARS), patients with severe hepatic insufficiency (SARS), patients with severe liver disease (EPP), patients with severe liver disease (EPP), patients with severe liver disease (EPP). (1) the patient received EBV treatment and cDNA readjustments. The PCR method does not require any information, such as the distribution, separation, and electrophoretic response of the system. The cDNA system requires a long-term response, and the normal one is not the same as that of the normal one. For a long period of time, the basic configuration of the cDNA system is to determine the number of errors, the number of children, and the number of children. The patient, the DNA, the parsing, the standing, the normal, the 9, the donor site, the initial position, the G, the A, the sudden, the clear, the baby. All of a sudden, all of a sudden, there is a new report. (2) the patient's family, the patient's family and the patient's family. In the case of the first child of the child, the first child of the patient, the first son of the father and the first and second son of the eldest brother, the child of the patient, the first son of the father, the first son of the eldest brother, the first son of the eldest brother, the first child of the father, the first son of the eldest brother, the first son of the eldest brother, the first child of the father, the first child of the eldest brother, the first child of the eldest brother, the first child of the father, the first child of the eldest brother, the child of the first and second son of the eldest brother, the child of the first child of the father and the eldest brother of the first and second child of the patient, the child of the first child of the father and the first and second son of the eldest brother, it is common to see the same child. The patient's eldest brother (EPP died), the second brother, the child, the patient, the patient, the elder brother, the elder brother, the second brother, the second brother The results of this study show that the family members of the family have a history of autosomal EPP and autosomal sex response. In this study, there is a possibility that DNA may be broken in patients with bone disease.

项目成果

Y.Nakahashi: "Human erythropoietic protoporphyria:indentification of a mutation at the splice donor site of in tron7 causing exon7 skipping of the ferrochelatase gene" Human Molecular Genetics. 2. 1069-1070 (1993)

Y.Nakahashi：“人类红细胞生成性原卟啉症：在 tron7 剪接供体位点处鉴定导致亚铁螯合酶基因外显子 7 跳跃的突变”《人类分子遗传学》。