Struktur und Funktion des tryptophan-synthetisierenden Enzyms aus Euglena gracilis

纤细裸藻色氨酸合成酶的结构和功能

• 批准号: 5271530
• 负责人: Professor Dr. Michael Kaufmann
• 金额: --
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1999-12-31 至 2002-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5271530?language=en
• 关键词: Struktur; und; Funktion; des; tryptophan

Die an der Synthese von Tryptophan beteiligten Enzyme sind je nach Quelle monofunktionell oder Produkte von Genfusionen. Das komplexeste Enzym ist das multifunktionelle tryptophansynthetisierende Enzym (MTSE) aus Euglena gracilis. Es katalysiert die letzten fünf Reaktionen der Tryptophansynthese. Das geringe Molekulargewicht von MTSE läßt sich nicht allein mit Genfusionen von fünf monofunktionellen Enzymen vereinbaren. Folglich müssen sich einige Bereich von MTSE strukturell von bekannten Enzymen der Tryptophansynthese unterscheiden. Entweder liegen erhebliche Deletionen vor, oder es werden zwei Reaktionen von einem aktiven Zentrum katalysiert. Schwerpunkt des Vorhabens ist es, die katalytisch aktiven Domänen von MTSE zu definieren und zu charakterisieren. Dazu ist beabsichtigt, das kodierende Gen zu klonieren und zu sequenzieren. MTSE sowie funktionelle Domänen davon sollen dann einzeln in E. coli exprimiert, gereinigt und charakterisiert werden. Dabei ist das Ziel, die Reaktionsspezifitäten der funktionellen Domänen biochemisch zu bestimmen. Darüber hinaus steht die Frage im Vordergrund, ob und welche Intermediate via "substrate channeling" zwischen den aktiven Zentren des Stoffwechselpartikels transportiert werden. Unterstützende Experimente zur Bestimmung nicht kovalenter Interaktionen einzelner Domänen sind mit dem "yeast two hybrid system" und durch "surface plasmon resonance"-Messungen geplant.

色氨酸结合酶的合成是单功能或基因融合的产物。这种复合酶是来自纤细眼虫的多功能抗生素合成酶（MTSE）。这是色氨酸合成反应的催化剂。Das geringe Molekulargewicht von MTSE läßt sich alein mit Genfusionen von fünf monofunktionellen Enzymen vereinbaren. Folglich müssen sich inige Bereich von MTSE strukturell von bekannten Enzymen der Tryptophansynthese unterscheiden.在这之前，有一个被删除的人，或者说是韦尔登，有两个来自一个活跃的催化剂中心的反应。Schwerpunkt des Vorhabens is es，die katalytisch aktiven Domänen von MTSE zu definieren and zu charakterisieren.大足是一个美丽的城市，它是一个城市，也是一个城市。MTSE sowie funktionelle Domänen davon sollen dann einzeln in E.大肠杆菌表达、遗传和特性韦尔登。Dabei is das Ziel，die Reaktionsspezifitäten der funktionellen Domänen biochemisch zu bestimmen.通过“基质沟道效应”，可以在前体中形成、形成和形成中间体，这种效应是通过激活韦尔登中的粒子来实现的。通过“酵母双杂交系统”和“表面等离子体共振”--Messungen geplant进行的非线性动力学相互作用的实验研究。