唾液腺水分泌時の蛍光色素calceinからみた低分子アニオン輸送の二方向性調節

从荧光染料钙黄绿素角度对唾液腺水分泌过程中低分子量阴离子转运的双向调节

基本信息

批准号：
07771660
负责人：
杉田誠
金额：
$ 0.51万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07771660/
关键词：
唾液腺水分泌アニオン分泌カルシウムイオン

项目摘要

本研究ではアニオン性の蛍光色素であるcalceinを唾液腺腺房細胞に取り込ませ,Ca^<2+>依存性の水分泌に関連したアニオン性物質の分泌動態の観察を可能にすることにより,以下の結果を得た。1.ラット顎下腺分離腺房細胞を用いた実験により,腺房細胞内に負荷したcalceinはムスカリン性刺激及びα-アドレナリン性刺激により細胞内Ca^<2+>濃度上昇とCa^<2+>依存性K^+チャネルの活性化を介し細胞内に放出されることが明らかとなった。2.摘出ラット顎下腺の潅流実験において細胞内に負荷したcalceinは腺腔側及び基底膜側の二方向に分泌され,無刺激時に細胞内calceinは一定の割合で基底膜側に放出されており,ムスカリン性刺激は腺腔側へのcalcein分泌を促進した。3.基底膜側への自発的なcalcein放出は細胞を脱分極させると減少し,Cl^-チャネル阻害剤により抑制されることより,calceinはアニオンとしてチャネル通して放出されると考えられたが,水分泌刺激時には若干の増加傾向がみられた。4.腺腔側へのcalcein放出は細胞内のCa^<2+>プールからの遊離による細胞内Ca^<2+>濃度上昇とCa^<2+>依存性K^+チャネルの活性化に伴い,ある種のチャネルの活性化により水分泌の初期相と関連し引き起こされると考えられ,共焦点レーザー顕微鏡を用いた観察により細胞内calceinの細胞外への分泌現象の可視化が可能となった。以上より,唾液腺腺房細胞内に負荷したカルセインにより,Ca^<2+>依存性の水分泌時におけるアニオン分泌が腺腔側及び基底膜側へ二方向性に分泌調節されることが観察され,細胞内Ca^<2+>濃度上昇とCa^<2+>依存性K^+チャネル及びCl^-チャネルの活性化とともに,水分泌調節に関与することが示唆された。

在这项研究中，将阴离子荧光染料钙软骨蛋白掺入唾液腺腺泡细胞中，从而观察到与Ca^<2+> - 依赖性水分分泌有关的阴离子物质的分泌动力学，并获得了以下结果。 1。使用大鼠下颌腺泡细胞进行的实验表明，钙调蛋白负载的细胞内细胞通过增加细胞内Ca^<2+>浓度增加，并通过毒蕈碱和α-肾上腺素能刺激激活Ca^<2+>依赖的K^+通道。 2. In the perfusion experiment of the isolated rat submandibular gland, calcein loaded intracellularly was secreted in two directions, on the glandular cavity and the basement membrane side, and when stimulation was not performed, the intracellular calcein was released at a certain rate to the basement membrane side, and muscarinic stimulation promoted calcein secretion to the glandular cavity side. 3。当细胞去极化并被Cl^通道抑制剂抑制时，自发性钙调蛋白释放到地下膜侧会减少，因此认为钙调蛋白被认为是通过通道作为阴离子释放的，但水分分泌刺激的量略有增加。 4。认为，释放到腺腔的释放是由于细胞内Ca^<2+>浓度的增加以及Ca^<2+>依赖的K^+通道的激活引起的共聚焦激光显微镜可以可视化细胞内钙体内分泌的细胞外分泌。 From the above, it was observed that calcein loaded intrasalivary gland acinar cells bidirectionally regulates anion secretion during Ca^<2+>-dependent water secretion to the glandular cavity and basement membrane side, suggesting that intracellular Ca^<2+> concentration increases and Ca^<2+> dependent K^+ channels and Cl^- channels are involved in the regulation of water secretion.