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双極性ニューロンによる神経回路網構築機構の解明―味覚伝導路をモデルとして―

阐明双极神经元构建神经网络的机制 - 以味觉传导通路为模型 -

基本信息

批准号：
12050229
负责人：
杉田誠
金额：
$ 4.1万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、味覚伝導路中の味細胞・一次ニューロン・二次ニューロン間で、特に双極性一次ニューロンが有する、味覚認識可能にするための、回路網の構築機構を解明することを目的とした。まず特定の味覚伝導路を可視化・標識し、回路パターンを把握し、一次ニューロンを中心に、神経回路の構築素子と、構築素子が有する分子機能を解明しようと試みた。特定味覚伝導路を可視化する方法として、特定味覚受容体の転写調節領域下に味覚受容体-GFP cDNAとtWGA-DsRed cDNAを、IRES配列を挿んで連結した導入遺伝子にょり、トランスジェニックマウスを作製した。そして特定味覚受容体の発現(舌上での空間配置)パターン、特定味覚受容体を発現する味細胞とシナプスを形成する双極性一次ニューロンの神経支配様式、及び一次ニューロンの延髄弧束核への投射様式の可視化・解析を遂行した。本マウスにおいては特定の味覚受容体を発現する味細胞が味覚受容体-GFP融合タンパク質とtWGA-DsRed融合タンパク質を共発現する。したがって特定味覚受容体の舌上での発現パターンをGFPの蛍光により可視化し、特定の味覚受容体を発現する味細胞と神経回路網を形成するニューロンの走行を、共発現させた経細胞性トレーサー(WGA)の移行を検出することにより、可視化することが可能となる(tWGA-DsRedの局在をDsRedの蛍光により検出)。一種の苦味受容体について作製したトランスジェニックマウスにおいて、一次ニューロンの細胞体が存在する神経節、及び一次ニューロンが二次ニューロンとシナプスを形成する延髄弧束核での、経細胞性トレーサー(tWGA-DsRed)の空間的配置は、現在詳細な解析を継続しているが、一種の苦味受容体-GFPは喉頭・咽頭部の味蕾中の味細胞に発現し、舌の葉状乳頭・有郭乳頭・茸状乳頭には発現していないことから、上喉頭神経支配領域の味蕾中に限局して発現することが示唆された。

The purpose of this study is to clarify the structure of taste cells, primary and secondary taste cells, and special bipolar primary taste cells in taste and taste pathways. To visualize specific taste pathways, identify them, identify Methods for visualizing specific taste receptor pathways include: receptor GFP cDNA, tWGA-DsRed cDNA, IRES alignment, linkage, and control of specific taste receptor pathways. The development of specific taste receptors (spatial arrangement on the tongue), the development of specific taste receptors, the formation of bipolar primary sensory control equations, and the visualization and analysis of primary sensory projection equations are carried out. The present invention relates to the co-production of specific taste receptors from taste cells, taste receptors, GFP fusion proteins and WGA-DsRed fusion proteins. The expression of GFP on the tongue of a specific taste receptor is visualized, and the expression of a specific taste receptor forms a network of taste cells and neural circuits. The movement of the taste receptor is detected, and the expression of GFP on the tongue of a specific taste receptor is visualized. A bitter receptor is composed of a cell body, a primary receptor and a secondary receptor.(tWGA-DsRed) space configuration is now analyzed in detail, a bitter receptor-GFP in the throat, pharynx and head taste buds taste cells appear, tongue leaf papilla, papilla, velvet papilla appear, upper laryngeal nerve control area in taste buds limited to appear.