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双極性ニューロンによる神経回路網構築機構の解明―味覚伝導路をモデルとして―

阐明双极神经元构建神经网络的机制 - 以味觉传导通路为模型 -

基本信息

批准号：
12050229
负责人：
杉田誠
金额：
$ 4.1万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、味覚伝導路中の味細胞・一次ニューロン・二次ニューロン間で、特に双極性一次ニューロンが有する、味覚認識可能にするための、回路網の構築機構を解明することを目的とした。まず特定の味覚伝導路を可視化・標識し、回路パターンを把握し、一次ニューロンを中心に、神経回路の構築素子と、構築素子が有する分子機能を解明しようと試みた。特定味覚伝導路を可視化する方法として、特定味覚受容体の転写調節領域下に味覚受容体-GFP cDNAとtWGA-DsRed cDNAを、IRES配列を挿んで連結した導入遺伝子にょり、トランスジェニックマウスを作製した。そして特定味覚受容体の発現(舌上での空間配置)パターン、特定味覚受容体を発現する味細胞とシナプスを形成する双極性一次ニューロンの神経支配様式、及び一次ニューロンの延髄弧束核への投射様式の可視化・解析を遂行した。本マウスにおいては特定の味覚受容体を発現する味細胞が味覚受容体-GFP融合タンパク質とtWGA-DsRed融合タンパク質を共発現する。したがって特定味覚受容体の舌上での発現パターンをGFPの蛍光により可視化し、特定の味覚受容体を発現する味細胞と神経回路網を形成するニューロンの走行を、共発現させた経細胞性トレーサー(WGA)の移行を検出することにより、可視化することが可能となる(tWGA-DsRedの局在をDsRedの蛍光により検出)。一種の苦味受容体について作製したトランスジェニックマウスにおいて、一次ニューロンの細胞体が存在する神経節、及び一次ニューロンが二次ニューロンとシナプスを形成する延髄弧束核での、経細胞性トレーサー(tWGA-DsRed)の空間的配置は、現在詳細な解析を継続しているが、一種の苦味受容体-GFPは喉頭・咽頭部の味蕾中の味細胞に発現し、舌の葉状乳頭・有郭乳頭・茸状乳頭には発現していないことから、上喉頭神経支配領域の味蕾中に限局して発現することが示唆された。

In this study, there are two kinds of drugs in the road, one time, the second time, the first time, the second time, the second time, the first time, the second time, the first time, the second time. There are molecular mechanisms that can be used to understand the identity of the specific information, the control of the loop, the center of the loop, the element of the loop, and the molecular mechanism of the circuit. The specific taste device can be used to modify the method, the specific taste receptor can be written in the field of the taste receptor-GFP cDNA tWGA-DsRed cDNA, and the IRES will be arranged as a link to the taste recipient. The specific taste receptor can be detected (in the space configuration on the tongue), the specific taste receptor can be detected, and the specific taste receptor can be analyzed and analyzed in the form of two-step, one-off, arc-beam projection. In this experiment, the specific taste receptor was detected, the taste cell was fused with GFP, the tWGA-DsRed fusion was detected, the tWGA-DsRed fusion was detected. On the tongue of the specific taste receptor, the GFP sensor light sensor is available, the specific taste recipient is sensitive to the smell, the loop network is formed, and the cellular transmission (WGA) is detected. You can make sure that you may have a problem (the tWGA-DsRed office is in the DsRed section). There is a kind of bitterness acceptor, which is used to treat the body of bitterness, the body of the cell, the cell, the cell. A kind of bitterness receptive body-GFP laryngopharynx taste buds are present in taste buds, tongue-shaped breasts with fluffy breasts, upper larynx gods dominate the field of taste buds, local taste buds show signs of instigation.