微小核融合法による不活性化中心の解析

使用微核融合法分析失活中心

• 批准号: 07772228
• 负责人: 吉田 郁也
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07772228/
• 关键词: 不活性X染色体; 不活性化中心; マウスEC細胞; 微小核細胞融合法; Xist遺伝子

(1)再活性化における不活性化中心(XIC)の役割:XIC領域を失ったヒト不活性X染色体を持つ放射線雑種を作製した後、この染色体を微小核細胞融合法でマウス胚性腫瘍(EC)細胞株OTF9-63に導入した。得られたいずれのクローンにおいても導入されたヒトX染色体断片はXIC領域の有無に関わりなく再活性化されたことが不活性X染色体の細胞学的特徴である晩期複製の消失や、ヒトX連鎖遺伝子の発現回復などから明らかになった。この結果は不活性X染色体の活性化過程にはXICが不要であることを示しており、体細胞分裂での不活性化状態の維持にXICが不要であることを示したBrown and Willard(1994)の結果に続いて、XICの機能が従来考えられていたものとは異なり不活性化開始に限定される可能性を示した。我々は先に不活性X染色体の再活性化はXIC領域とそれ以外の染色体領域では独立に制御されていることを示したが、今回の結果はこの事実ともよく一致する。最近、XICにマップされ不活性化の開始に関与する遺伝子Xistの産物(RNA)が間期核中の凝縮した不活性X染色体(Barr body)上で直接DNAと結合していることが示された。我々の放射線雑種を用いればXist RNAが不活性X染色体の凝縮に必須のものであるかを検証できるであろう。(2)ヒトXICのマウス細胞内での働き:完全長のヒト不活性X染色体を含むマウスEC細胞でマウス、ヒトいずれのX染色体でも不活性化が起こらなかったことから、ヒトXICはマウス細胞中で機能できないと予想された。ヒトとマウスのXICには両種が分岐して以来かなりの違いが蓄積されて来たのかもしれない。いずれにせよ今回得られたヒトーマウス雑種細胞ではこれ以上の展望は望めないので、XICの機能を知るためにさらに新たな系を開発する必要がある。この目的で別種マウス由来のX染色体を持つEC、ES細胞の作製を開始している。

(1) reactivating the inactivation center (XIC) in the field of XIC: after the inactive X chromosome held the radiation line, the embryonic embryo (EC) cell line OTF9-63 was introduced into the cell line by the method of micronucleus fusion. In the field of XIC, there is no significant difference in the number of X chromosome fragments in the field of inactive X chromosomal reactivity. in the field of inactive X chromosome cytology, the special phase of inactive X chromosome cytology has disappeared. Results the process of inactivation of inactive X chromosomes did not affect the process of XIC, and the status of inactivation of somatic mitosis was maintained. The results of Brown and Willard (1994) showed that the possibility of inactivation was not limited by the possibility of inactivation. We first inactive X chromosomes and then activate them in the field of XIC. In addition to the field of chromosomes, we independently control the detection of chromosomes. The results show that the results are consistent with each other. Recently, the beginning of the inactivation of the Xist gene and the nucleic acid on the inactive X chromosome (Barr body) in the phaseatic nuclei of the XICA gene have been detected by direct DNA binding assay. It is necessary for us to use Xist RNA inactive X chromosomes to coagulate radiation lines. (2) the complete growth of the inactive EC chromosomes, the inactivation of the EC chromosomes, the inactivation of the X chromosomes, and the activation of the chromosomes in the cells. (2) the complete growth of the inactive X chromosomes in the cells of the XIC cells. Since the beginning of the XIC dispute, we have been accumulating information on the basis of each other's differences. This time, we have received a lot of information about all kinds of cell phones, and we hope that the XIC will be able to know that you will be able to meet the needs of the new market. Objective the origin of other kinds of diseases is that the X chromosome holds the cells of EC and ES to start the transmission process.

项目成果

Yoshida,I.,Kimura,H.,&Takagi,N.: "The mouse Mcmd Gene for DNA Replication Protein P1MCM3 Maps to Bands A3-A5 on Chromosome 1 by Fluorescene in Situ Hybridization" Genomics. (in press). (1996)

吉田，I.，木村，H.，