权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

不活性X染色体の複製時期を支配する因子

控制失活 X 染色体复制时间的因素

基本信息

批准号：
06857182
负责人：
吉田郁也
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

早期複製型不活性X染色体を持つマウス胸腺リンパ腫細胞MTLB3にマウスやヒトのX染色体を微小核細胞融合法で導入する試みは失敗に終わった。この原因は不明であるが、他の胸腺リンパ腫由来細胞株へのX染色体の導入もことごとく不成功に終わったところからみて、付着性の細胞の場合とは異なり、浮遊細胞への単一染色体の導入は難しいのかも知れない。しかし、予備実験の段階で行ったヒト不活性X染色体のマウス胚性腫瘍細胞(EC)への導入実験から、研究は思わぬ方向に展開した。用いたECは、XOの性染色体構成をもつPSA-TG8とOTF9-63の2株で、これらのECに、マウスやその近縁のげっ歯類の体細胞を融合すると体細胞由来の不活性X染色体が再活性することが明らかになっている。また、再活性化が起こった雑種細胞を分化させると数本あるX染色体がランダムに再び不活性化する。他方、ハムスターやヒトなどの細胞をこれらのECに融合しても雑種細胞は得られない。微小核細胞融合法により、1本のヒトX染色体を持つクローンが両ECあわせて20クローン単離できた。いずれのクローンでも、導入されたヒトX染色体は他のマウス染色体と同調的に複製するようになっており、その上に存在するX連鎖遺伝子の発現も回復していたため、ヒト由来の不活性X染色体の再活性化が起こったと判断した。しかし、驚いたことに不活性X染色体からのみ発現すると考えられていたXIST遺伝子の発現がこれらの再活性化したヒトX染色体で認められた。この事実は単にXIST遺伝子が発現しているだけでは不活性化が起こらないことを示している。更に、レチノイン酸処理など、種々の方法でこれらのクローンに細胞分化を誘導したところマウスのXist遺伝子の発現が誘導された。また頻度は極端に低いが、マウスのX染色体に再不活性化が起こっていることも明らかになりつつある(以上、投稿準備中)。

Early replication-type inactive X chromosome was successfully introduced into MTLB3 cells. The reason for this is unknown, and the introduction of X chromosome into other thymic cells is not successful. The introduction of X chromosome into other thymic cells is difficult. The introduction of inactive X chromosomes into embryonic carcinoma cells (EC) was carried out at different stages of preparation. 2 strains of PSA-TG8 and OTF9 -63 were fused with somatic cells of EC and XO, and the somatic cells of the two strains were inactivated by somatic cell origin. The number of X chromosomes in the differentiated cells was increased by reactivation. The other side, the other side. The micro-nuclear fusion method is used to detect the X chromosome and to detect the 20 chromosome fragments. The occurrence of X-linked genes in the genome, the reactivation of inactive X chromosomes, and the reactivation of non-active X chromosomes in the genome. The X chromosome is inactive, and the X chromosome is inactive. The XIST gene appears in the middle of the process and becomes inactive in the middle. In addition, the method of acid treatment and seed culture is to induce the differentiation of cells and the development of Xist gene. The frequency is extremely low, and the X chromosome is inactivated again.(The above is in preparation for submission)