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マウスES細胞の染色体操作によるX染色体不活性化の解析

小鼠 ES 细胞染色体操作导致 X 染色体失活的分析

基本信息

批准号：
08772158
负责人：
吉田郁也
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

当初の計画では、不活性化の起こり易さに影響を与える遺伝子座Xceの機能を探る目的で、マウス胚性腫瘍(EC)細胞や胚性幹(ES)細胞に別系統、別種由来のX染色体を導入して2倍性EC、ES細胞株を得た後、in vitro,vivoでの分子誘導による不活性化頻度のかたよりについて詳細な検討を試みる予定であった。しかし、予備実験的に行ったヒト不活性X染色体のマウス細胞への導入実験で意外な事実が明らかとなり、思いがけない方向へ研究は進みつつある。ヒト由来の染色体としては不活性X染色体のみを持つ雑種細胞CF150から微小核融合法でヒトX染色体をマウスEC細胞に導入したところその複製時期は晩期型から早期型へと顕著に変化し、その上にある遺伝子の発現も回復したことから再活性化が起こったと考えられた。しかし、通常は活性化にともない不活性型となるはずのXIST遺伝子が活性を持ち続けることが明らかになった。この遺伝子上流のメチル化状態はクローンによって様々でありマウスEC細胞はヒトXISTのメチル化状態を不完全にしか変えられないことが示された。さらに得られたクローンを細胞分化させることより再不活性化を試みた。予備実験の階段では低頻度ながらもマウス、ヒトX染色体の何れも不活性化し得るのではないかと思われたが、詳細な細胞学的観察によりその可能性は否定された。以上よりヒトX染色体上の不活性化中心はマウス細胞の中では完全に機能しないことが明らかになった。更にCF150細胞中でヒト不活性X染色体はSex chromatin bodyを形成せず高アセチル状態にあるという興味深い事実が明らかになった。この異常状態はCF150由来の不活性X染色体をヒト細胞に移入すると解消されることから、これらの現象にヒト特異的因子が関与する可能性が示された。ヒトーマウス間の種差を利用すればこの因子を同定できる可能性がある。

In the first place, it was planned and inactivated to induce genetic transformation, and the Xce mechanism of the zygote was able to explore the purpose, the embryogenic cycle (EC), the embryogenic cell (ES), the differential system, the transfer of X chromosomes into the ploidy EC, the ES cell lines, and the in vitro. The vivo molecule directs the inactivation to determine the accuracy of the activity. In the case of inactive X chromosomes, the cells of the inactive X chromosomes are divided into the cells of the inactive X chromosomes, the cells of the inactive X chromosomes. Because of the origin of chromosomal DNA, inactive X chromosomes, inactive X chromosomes, CF150 chromosomes, micronucleus fusion methods, X chromosome DNA micronucleus fusion method, the method of micronucleus fusion, the method of micronucleus fusion. Active, usually inactive, active, XIST, active, active, inactive, inactive. In the upper stream, the status is not complete. The status is not complete. The EC is not completely displayed. If you don't want to be active again, you will not be able to do so. In order to study the possibility of inactivation of the X chromosome, the observation of the possibility of inactivation of the X chromosome and the possibility of the inactivation of the X chromosome. The inactivation center on the X chromosome in the above chromosome shows that the complete mechanism is sensitive. In the cell of CF150, the inactive X chromosome "Sex chromatin body" forms the high level of disease, the shape of the cell, the deep flavor of the cell, the deep taste of the cell, the formation of the inactive X chromosome in the cell. The origin of the inactive X chromosome, the cell, the cell, the CF150, the cell, the cell. The possibility of the difference is the same as that of the factor.