NAD glycohydrolase (CD38)の生理的役割に関する研究

NAD糖水解酶(CD38)的生理作用研究

• 批准号: 07780533
• 负责人: 星野 真一
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07780533/
• 关键词: NAD; 環状ADPリボース; NAD代謝酵素; ADPリボース環化酵素; ヒトリンパ球表面抗原CD38; カルシウムイオン; 情報伝達

我々は先に、NAD^+を基質とした細菌毒素の触媒するG蛋白質のADPリボシル化の研究を背景に、レチノイン酸(RA)によるHL-60細胞の好中球への分化過程にNAD^+分解酵素が誘導され、その酵素がヒトリンパ球表面抗原のCD38分子によることを明らかにした。CD38はアメフラシの卵精巣より単離されたADPリボース環化酵素と構造上類似し、さらに生成物である環状ADPリボースは、IP_3と同様にある細胞内プールからCa^<2+>を放出させる作用をもつことから、この新規環上ヌクレオチドは細胞内で新たなシグナル分子として機能することが期待された。本研究では、細胞内外でNAD^+を基質とする代謝酵素が情報伝達系において果たす生理的役割、また哺乳動物における環状ADPリボースの産生機構、並びにNAD^+分解酵素とADPリボース環化酵素との触媒活性の差異を生じさせる機構の解明を目的とし、以下の知見を得た。1. RA-分化HL-60細胞を抗CD38単クローン体抗体で刺激すると、いくつかの細胞内蛋白質がチロシンリン酸化されたが、その一つを120kDaのc-cbl遺伝子産物と同定した。2.この抗CD38単クローン性抗体刺激によって、化学遊走因子の受容体を介するHL-60細胞の活性酸素産生が増強された。3. Zn^<2+>がCD38に作用すると、そのNAD^+分解活性が抑制され、ASPリボース環化活性は逆に促進された。すなわち、Zn^<2+>によるCD38の酵素特性の転換が認められた。4. CD38遺伝子の第1イントロン内には、RAによってその抑制が解除されるnegative regulatory element (NRE)が存在し、RA(受容体)を介する新しい転写調節機構の存在が推定された。

In this paper, we study the induction of NAD^+-degrading enzymes and CD38 molecules in HL-60 cells during the differentiation process of mitochondria by NAD^+-degrading enzymes. CD38 is a novel intracellular cyclase that is similar in structure and similar in structure to IP_3, and is expected to release Ca^<2+> into the cell. This study provides insight into the mechanisms for the production of NAD^+ catabolic enzymes and cyclic ADP cyclases in mammalian and intracellular signaling systems, as well as into the differences in activity of NAD^+ catabolic enzymes and cyclic ADP cyclases. 1. RA-differentiated HL-60 cells were stimulated by anti-CD38 monoclonal antibodies, and the intracellular proteins were acidified, and the 120kDa c-cbl gene products were also determined. 2. Stimulation with this anti-CD38 monoclonal antibody enhanced the production of active acids in HL-60 cells mediated by receptors for chemokinetic factors. 3. Zn^<2+> inhibits the NAD^+ decomposition activity of CD38 and promotes the cyclization activity of ASP ^<2 +>. The enzyme properties of CD38 were studied by enzyme digestion and enzyme digestion. 4. The first part of the CD38 gene contains a negative regulatory element (NRE), RA(receptor), and the presence of a new regulatory mechanism.

项目成果

Katsunobu Takahashi: "Accumulation of cyclic ADP-ribose measured by a specific radioimmunoassay in differentiated human leukemic HL-60 cells with all-trnas-retinoic acid." FEBS Lett.371. 204-208 (1995)

Katsunobu Takahashi：“通过特定的放射免疫测定法，用全反式视黄酸在分化的人类白血病 HL-60 细胞中测量环状 ADP-核糖的积累。”