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アフリカツメガエル肝細胞における変態制御遺伝子の単離と解析

非洲爪蟾肝细胞变态调控基因的分离与分析

基本信息

批准号：
07780657
负责人：
彦坂暁
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

無尾両生類の肝臓の変態期における遺伝子発現変化を調べるために、アフリカツメガエル(X. laevis)を用いて主に以下の2つの方向で研究を行った。1.幼生期肝臓由来cDNAライブラリーと変態期肝臓由来cDNAライブラリーを用いてサブトラクションを行った。得られたいくつかのクローンを用いてdigラベルしたプローブを作製し、変態期前後の肝臓由来RNAを用いてノザンブロットを行った。それらの内の一つは変態期に発現が著しく低下することが明らかになった。そこでDideoxy法によりこの塩基配列を決定し、DDBJに対するホモロジーサーチを行ったところ、これがアフリカツメガエルのトリプシンに高い相同性をもつことがわかった。このcDNAは、すでにShiら(1990)によって報告されているアフリカツメガエルトリプシンと高い相同性をもつが、完全には一致しておらず、特に3'側非翻訳領域の配列は大きく異なっていた。2.前変態期幼生を甲状腺ホルモンで処理し、肝臓からRNAを抽出した。Differential Display法を用いて、同時期の未処理の幼生の肝臓から抽出したRNAと比較を行ない、遺伝子発現の変化の解析を試みた。発現が変化するいくつかのバンドを見い出し、これらをクローニングした。これらからdigラベルしたプローブを作製し、現在順次ノザンブロットによる解析を行っている。現在までに幼生期から成体期にかけて緩やかに発現が上昇するクローン、変態最盛期に強く発現するクローン、などを見い出している。

There is no end-of-life in the health care system. In this case, the following two directions are used to study the operation in the following two directions: X. Laevis). 1. The origin of the liver in the infancy stage is the origin of the liver in the cDNA stage. The liver in the infancy stage is caused by the liver in the infancy stage. The liver in the infancy stage is caused by the liver in the infancy stage. Please tell me that you need to use the word "dig" to make the diagnosis, and to use the word "RNA" before and after the period to make sure that you have a problem with the liver. In the first half of the year, there is a situation in which you are in a bad mood. The Dideoxy method is based on the determination of the column, the DDBJ method, the column, the column. "cDNA", "Shi" (1990), "report", "report," report, report. two。 In the previous stage, the thyroid gland was extracted from the thyroid gland and the liver was extracted from the RNA. The Differential Display method was used to compare the results of the Differential Display method, and the results of the Differential Display method were used to compare the data of the infant liver samples extracted from the infant liver in the same period. Now that you know what's going on, you need to know what's going on, so that you don't know what to do. This is the first time that you will be able to parse the data from the dig. Now in the infancy, the adult period, the adult stage, the peak period, the peak period, the peak