ガレクチンファミリーによる初期発生制御と生体防御システム成立機構

半乳糖凝集素家族的早期发育控制和生物防御系统建立机制

基本信息

批准号：
15040216
负责人：
中村隆範
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Kagawa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15040216/
关键词：
ガレクチンアフリカツメガエル発生 galectin-3 CGL 糖鎖

项目摘要

ガレクチンファミリーはβ-ガラクトシド結合を持った糖鎖を特異的に認識する動物レクチンで、哺乳動物で14種の遺伝子が同定されているが、魚類、両生類、鳥類など他の脊椎動物や海綿、線虫、ショウジョウバエなど無脊椎動物にも広く存在している。我々は、ヒトgalectin-8,-9(タンデムリピート型)が、既知のケモカインとは異なる新しい顆粒球の遊走因子であることを見出し、感染・炎症などと密接に関連することを明らかにした。一方、アフリカツメガエルから12種の新規ツメガエル遺伝子を同定しその機能解析を進めている。本研究では、ガレクチンファミリーの初期発生から器官形成の場における機能を中心に、ツメガエルガレクチン遺伝子、蛋白質の発現を網羅的に解析しながら糖鎖の役割を明らかにする。本年度は、哺乳類キメラ型galectin-3のツメガエルホモログであるxgalectinVIIaの標的候補分子、卵表層顆粒レクチン(CGL)と高い相同性を有する、新規CGL(CGL-2と命名)をクローニングした。さらにCGL、CGL-2をトリプシン消化して、xgalectinVIIaの認識領域糖ペプチドを精製(3箇所あるN-結合糖鎖結合部位のうち2箇所に相当)し、さらに認識しているN-結合型糖鎖の構造解析を実施した。その結果、哺乳類では見られないような電荷をもった糖鎖構造や哺乳類でも共通して見られるN-アセチルラクトサミン型N-グリカンが認識糖鎖であることが明らかとなった。また、CGLのN結合糖鎖結合部位には高マンノース型糖鎖も結合し、これらはxgalectinVIIaとは結合しないことも分かった。このように、初期発生におけるガレクチンと他のレクチンファミリーの糖鎖認識を介したクロストークの可能性が考えられた。ガレクチンの新規機能解明の端緒になると期待される。

肠lectin蛋白家族是一种动物凝集素，特异性地识别具有β-半乳糖苷键的聚糖，尽管在哺乳动物中已经鉴定出14个基因，但它们在其他脊椎动物中广泛存在，例如鱼类，两栖动物，鸟类，鸟类，以及诸如海绵，nematodes和derosophilla之类的无脊椎动物。我们发现，人类乳糖素-8，-9（串联重复类型）是一种与已知趋化因子不同的新粒细胞迁移因子，并表明它与感染和炎症密切相关。同时，从爪蟾中鉴定出12种新型的异武基因，并且正在进行功能分析。在这项研究中，我们将通过全面分析Xenopus lectectin基因和蛋白质的表达来阐明聚糖的作用，从而重点介绍从乳肠蛋白家族的最初发展到器官发生的器官发生的功能。今年，我们克隆了一种新型的CGL（称为CGL-2），该CGL与卵表面颗粒凝集素（CGL）具有高度同源性，这是一种用于Xgalectinviia的靶候选分子，Xgalectinviia，Xgalectinviia，Xenopus的Xenopus同源物的同源物。此外，将CGL和CGL-2胰蛋白酶胰蛋白酶纯化以纯化Xgalectinviia的识别区域糖肽（对应于三个N-连接的Glycan结合位点中的两个），并进一步分析了公认的N-链接聚糖。结果，据揭示了通常在哺乳动物中发现的N-乙酰乳糖胺型N-聚糖是公认的聚糖。还发现，高甘露糖型聚糖也附着在CGL的N连接的聚糖结合位点上，并且这些结合位点没有与Xgalectinviia结合。因此，可以认为在早期发育过程中通过甘氨酸和其他凝集素家族的糖基化串扰是可能的。预计将标志着阐明半乳糖素的新功能的开始。