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疣贅状表皮発育異常症に伴う皮膚がんにおけるヒトパピローマウイルス遺伝子発現の解析

疣状表皮松解症相关皮肤癌中人乳头瘤病毒基因表达分析

基本信息

批准号：
07770178
负责人：
清野透
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Aichi Cancer Center Research Institute
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770178/
关键词：
疣贅状表皮発育異常症扁平上皮癌 SCIDマウス 47型ヒトパピローマウイルス E6

项目摘要

疣贅状表皮発育異常症(EV症)に伴う皮膚がんや、子宮頸がん発生における最大の危険因子は、ヒトパピローマウイルス(HPV)の感染であると考えられている。我々はEV症皮膚がんの、SCIDマウスへの移植を試み成功した。SCIDマウスで増殖した皮膚がん細胞は、組織学的に原発巣の特徴を維持しており、現在まで34ヶ月、10代に渡り継代している。これらのがん細胞には、原発巣と同様47型HPV DNAが複製維持されている。ウイルスDNA量は継代により多少変動するものの細胞当り10^<2-4>コピーの範囲で維持されていた。これらの細胞中におけるウイルス遺伝子の発現をRNAレベルで調べたところ、主たるウイルスmRNAは2.3kbおよび1.4kbであり、それぞれ、E6蛋白、E7蛋白の産生を担っていることが示唆された。さらに、SCIDマウスを経由して各継代より同皮膚がん培養細胞株の樹立にも成功しているが、株化によりウイルスDNAの存在様式は大きく変化しないものの、細胞当たりのコピー数は減少することが分かった。これらの培養細胞株にCa^<2+>、TPAにより分化誘導したが、ウイルスDNAのコピー数は変化しなかった。分化程度の異なるがん細胞間でウイルスDNAのコピー数が異なるか否かを検討するため、in situハイブリダイゼーションを行なった。これまで、高分化細胞においてウイルスDNAのコピー数が高くなる傾向を観察した。以上の実験結果から、EV症由来皮膚がん細胞におけるHPV遺伝子の発現を転写レベルで明らかにした。特に、in vitroでトランスフォーム活性を担うE6遺伝子が、in vivoのがん細胞においても発現しており、E6遺伝子がウイルスのがん原性、がん細胞の維持に必要であることが示唆された。

The common disease of verrucous epidermis (EV's disease) is associated with the skin disease, the child has the largest risk factor, and the child has the highest risk factor (HPV). We found that the skin of EV's disease was grafted successfully, and SCID's skin graft was successful. The cells of SCID colonization and histology have been maintained, and they are now in the last 34 months and 10 generations. The original model is the same as the 47-type HPV DNA copy to maintain the data transmission. Check the amount of DNA you need to determine how much you want to change the number of users when you use 10 ^ & lt;2-4 GT; the range of data sets to maintain the performance of your computer. The RNA was detected in the cell. The host was infected with mRNA, 2.3kb, 1.4kb, E6, E7, and so on. In each generation, the cell lines were cultured in the same way as in each generation, and the cell lines were successfully cultured. There was a formula for the growth of SCID cells, such as the number of cells, the number of cells, the number of cells and the number of cells. The cell lines of Ca ^ & lt;2+>, TPA and DNA were cultured in vitro, and the differentiation and differentiation of cell lines were induced. The degree of differentiation varies according to the degree of differentiation. The degree of differentiation is different from the level of differentiation. The degree of differentiation is different from the level of differentiation. The degree of differentiation is different from the level of differentiation. The degree of differentiation is different from the level of differentiation. The degree of differentiation is different from the level of differentiation. The number of cells in the cell, the number of cells, the number of cells, the level of differentiation, the degree of differentiation, the level of differentiation, the number of cells, the level of differentiation, the level of differentiation, The number of highly differentiated cells, highly differentiated cells, DNA cells, cells and cells. The results of the above tests show that the cause of EV disease is caused by the skin disease. The HPV syndrome is caused by the skin disease. Special, in vitro, in vivo, E6, E6, and E6.