MRSAの高度耐性化を規定する遺伝子のクローニング

克隆对 MRSA 具有高抗性的基因

• 批准号: 07770206
• 负责人: 近藤 典子
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770206/
• 关键词: MRSA; 高度耐性化

MRSAのメチシリン高度耐性化を規定する遺伝子のクローニングを行う目的で、以下の実験を行った。1.メチシリン低濃度存在下では増殖できないがメチシリン高濃度存在下では増殖できる、Eargle-typeMRSAであるN315h4株の染色体DNAを制限酵素Sau3A1で不完全切断し、2〜6kbの断片を切り出した。これを温度感受性のオリジンと、テトラサイクリン耐性遺伝子を持つベクターpYT3にクローニングした。2. N315h4株染色体DNAのプラスミドライブラリーを、mecA、mecl遺伝子を持つメチシリン感受性株N315株にエレクトロポレーションにより導入し、22,580の形質転換株を得た。3.プラスミドが導入されたN315株を、メチシリン10μg/ml含有平板と100μg/ml含有平板にレプリカし、メチシリン100μg/ml含有平板でより増殖している株を3株得た。このうち2株のプラスミドは、同一のDNA断片を含むことがわかった。4.得られた2つのプラスミド(p10-2、P3-2)をN315株にエレクトロポレーションにより導入したところ、N315h4株と同様なEagle-typeの耐性パターンを示し、メチシリン中等度耐性株のN315LR5株に導入したところ、高度耐性化した。得られたDNA断片の塩基配列の決定を行った。

MRSA is highly resistant to infection. 1. In the presence of low concentration of MRSA, the chromosome DNA of strain N315h4 was restricted by Sau3A1, which was not completely cut, and 2 ~ 6kb fragment was cut out. The temperature sensitivity and temperature tolerance of the gene are determined by the temperature sensitivity and temperature sensitivity. 2. N315 strain N315 strain 3. The N315 strain was introduced into the culture medium containing 100μ g/ml plate and 3 strains were obtained from the medium containing 100 μ g/ml plate. The two strains of DNA contain the same DNA fragment. 4. N315 strain N315 strain DNA fragment alignment is determined.

项目成果

近藤典子: "高度耐性MRSAの耐性機構" 治療. 78.1. 124-125 (1996)

Noriko Kondo：“高耐药性 MRSA 的耐药机制”78.1（1996）。