EOAHA原因遺伝子のポジショナルクローニングによる解明

通过定位克隆阐明 EOAHA 致病基因

• 批准号: 07770448
• 负责人: 田中 一
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770448/
• 关键词: EOAHA; フリードライヒ失調症; 連鎖解析; homozygosity mapping; マイクロサテライト多型

1.従来からの研究で既に合成済みのオリゴヌクレオチドプライマーも活用するとともに、常染色体全てについて最大でも15〜20センチモルガンの間隔でマイクロサテライト多型(dinucleotide,trinucleotide,tetranucleotide)解析用のFITC labeled oligonucleotide primer 470組を系統的に合成した。またDNA自動シークエンサーを用い、迅速かつより安全性の高いマイクロサテライト解析システムを完成した。2.EOAHA患者・家族のゲノムDNAを鋳型DNAとし、用意した多数のプライマーセットを用いてポリメラーゼ連鎖反応(PCR)を行い、ポリメラーゼ連鎖反応生成物をDNA自動シークエンサーにて解析し、それぞれのマイクロサテライト多型における対立遺伝子(アリル)パターンの同定を行った。日本人正常対照においても同様に解析を行い日本人正常対照における対立遺伝子頻度を算出し、これを連鎖解析のための基礎的データとして利用している。3.EOAHAとの臨床的類似点を有するフリードライヒ失調症(FRDA)が第9染色体長腕上のD9S111と密に連鎖する事が明かとなっているので、EOAHAにおいてもD9S111を中心に第9染色体短腕〜長腕上の10種類のマイクロサテライト多型を用いて連鎖解析を行った。二点連鎖解析ではD9S111において組換率0.10で最大ロッド得点3.43を得たが、D9S111と組換えを認めEOAHAとFRDAは遺伝子座位を異にする可能性があると考えられた。現在全染色体にセットしたマイクロサテライト多型を用い、homozygosity mappingによる系統的な解析を精力的に進めている。

1. In recent years, the research has been carried out on the systematic synthesis of 470 sets of FITC labeled oligonucleotide primer for dinucleotide,trinucleotide,tetranucleotide analysis. DNA auto-detection and analysis are completed quickly. 2. The essential DNA of EOAHA patients and families is typed DNA, and most of the primavera sites are used to perform polymerase chain reaction (PCR), the products of the primavera chain reaction are analyzed by DNA automatic analysis, and the multiple types of primavera are detected to determine the identity of the independent gene. Japanese normal response analysis, Japanese normal response analysis 3. The clinical similarities between EOAHA and FRDA are closely linked to D9S111 on chromosome 9, and EOAHA is closely linked to D9S111 on chromosome 9. 2-point linkage: D9S111, D9 S1111, D9S111 S1111, D9S111 S11 S111 S111, D9 S11 S Now the whole chromosome is in use, homozygosity mapping is in use, and the whole chromosome is in use.

项目成果

Kazuhiro Sanpei et al.: "Direct detection of expanded(CAG/CTG)repeats in the myotonin-protein kinase genes of myotonic dystrophy patients using high-stringency hybridization method" Biochem.Biophys.Res.Comm.212. 341-346 (1995)

Kazuhiro Sanpei 等人：“使用高严格杂交方法直接检测强直性肌营养不良患者的肌强直蛋白激酶基因中的扩展 (CAG/CTG) 重复序列”Biochem.Biophys.Res.Comm.212。

Yoshinori Tanno et al.: "Quantitation of heteroplasmy of mitochondrial tRNA Leu(UUR)gene using PCR-SSCP" Muscle&Nerve. 18. 1390-1397 (1995)

Yoshinori Tanno 等人：“使用 PCR-SSCP 对线粒体 tRNA Leu (UUR) 基因的异质性进行定量” 肌肉

Toshihisa Tanaka et al.: "Lack of association between dopamine D4 receptor gene and schizophrenia" Am.I.Med.Genet.60. 580-582 (1995)

Toshihisa Tanaka 等人：“多巴胺 D4 受体基因与精神分裂症之间缺乏关联”Am.I.Med.Genet.60。

Hajime Tanaka et al.: "The gene for hereditary progressive dystonia with marked diurnal fluctuation maps to chromosome 14q" Annals of Neurology. 37. 405-408 (1995)

Hajime Tanaka 等人：“具有明显昼间波动的遗传性进行性肌张力障碍的基因映射到染色体 14q”《​​神经病学年鉴》。

Takeshi Ikeuchi et al.: "Dentatorubral-pallidoluysian atrophy:Clinical features are closely related to unstable expansions of trinucleotide (CAC) repeat" Annals of Neurology. 37. 769-775 (1995)

Takeshi Ikeuchi 等人：“齿状红核苍白球萎缩：临床特征与三核苷酸 (CAC) 重复不稳定扩张密切相关”《神经病学年鉴》。