皮膚アミロイド形成における表皮角化細胞アポトーシスの関与

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本年度は、アポトーシスの存在が想定された皮膚腫瘍(毛母腫、ケラトアカントーマ)において、ニックエンドラベリング法を用いて表皮角化細胞のアポトーシスが存在するかを解析した。その結果明らかに一部に少数のアポトーシスが存在した。しかし、同一標本のHE染色ではアミロイドの存在をin vivoで組織学的に同定することはできなかった。現在その他の皮膚腫瘍(特に基底細胞癌)、肛門・仙骨部皮膚アミロイドーシスやアミロイド苔癬などの限局性皮膚アミロイドシースについてもニックエンドラベリング法を用いて表皮角化細胞のアポトーシスが存在するかを解析するため標本の収集を引き続き行っている。また培養ヒト表皮細胞をさまざまのconfluentの状態で観察したが角化傾向が進むとともに一部にアポトーシスとも思える細胞死を認めた。今後さまざまなconfluentの状態およびγIFN作用後、抗Fas抗体を作用させた場合の培養ヒト表皮細胞のアポトーシスの存在とアミロイドの形成の有無について、核酸蛋白同時抽出試薬ISOGENLSを用いてDNA、蛋白を抽出したものについて、DNAはアガロースゲルを用いて電気泳動しアポトーシスの指標であるDNA radder pattemを、検出蛋白成分にはアミロイド細線維が存在するかどうかをX線解析および赤外線スペクトロスコピーによりanti-parallel B-pleated sheetの構造を確かめ、アミロイドの形成を確認する予定である。