Elucidation of molecular pathogenesis of TTR amyloid neuropathy

阐明 TTR 淀粉样神经病的分子发病机制

基本信息

批准号：
21K07307
负责人：
村上龍文
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Kawasaki University of Medical Welfare
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2023-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07307/
关键词：
アミロイドーシストランスサイレチン修復シュワン細胞ニューロパチー家族性アミロイドポリニューロパチー末梢神経再生 c-Jun ヒトTTR遺伝子ヒトトランスサイレチン遺伝子アミロイドニューロパチーシュワン細胞アポトーシスアミロイド

项目摘要

家族性アミロイドポリニューロパチー（FAP; ATTRv）では異型トランスサイレチン（TTR）が末梢神経に沈着し、神経障害を起こすがその病態機序は不明である。我々はこれまでシュワン細胞でTTR遺伝子を発現しているのを見出し、ヒト異型TTR遺伝子発現FAPモデルマウスのDRGから不死化シュワン培養細胞TgS1を確立し、シュワン細胞の神経障害への関与について研究をすすめてきた。本研究ではこのTgS1をシュワン細胞増殖培地(SCM)と通常の培養細胞培地(CM)で培養し、TTR遺伝子とシュワン細胞マーカー遺伝子の発現を定量RT-PCRで調べた。TgS1はCM培地では増殖が停止し、小さな紡錘状の形態を呈した。TTR遺伝子はCM培地で約1700倍と著明に増加し、分化マーカー遺伝子ではミエリン蛋白であるMpZは減少し、Sox10やNgfrは増加していた。次に修復シュワン細胞マーカー遺伝子の発現を定量したところ、c-Jun、Sox2、Gdnfでは増加していた。さらに免疫細胞染色とウエスタンブロット法で調べると、TTR蛋白はGolgiに局在し、細胞外に分泌されていた。さらにTgS1にc-Jun siRNAを導入するとc-Junは低下し、TTRは19%まで著明に減少した。逆にTTR siRNA導入するとTTRは減少したが、修復シュワン細胞の表現型は保たれていた。最後にHsf1遺伝子発現をsiRNAで低下させると細胞内にTTR凝集が認められた。TgS1はCMでreprogrammingされ修復細胞の表現型を呈し、c-Junを介してTTR遺伝子発現が著明に増加することが明らとなった。FAPではアミロイド圧迫による神経近位部の軸索障害で、遠位部のシュワン細胞が修復シュワン細胞へ変化し、TTR遺伝子発現が著明に増加し、末梢神経内膜へのTTR沈着を増強していることが示唆された。

在家族性淀粉样蛋白多神经病（ATTRV）中，非典型的经胸蛋白（TTR）沉积在周围神经中，导致神经病，但其病理状况的机制尚不清楚。我们以前已经发现，TTR基因在Schwann细胞中表达，从表达人类非典型TTR基因的小鼠的FAP模型的DRG中建立了永生的Schwann培养细胞TGS1，并一直在促进对他们参与神经疾病的研究。在这项研究中，TGS1在Schwann细胞生长培养基（SCM）和常规培养细胞培养基（CM）中培养，并通过定量RT-PCR检查了TTR基因和Schwann细胞标记基因的表达。 TGS1在CM培养基中增殖，并表现出小纺锤样形态。在CM培养基中，TTR基因显着增加了约1700倍，并且分化标记基因中髓磷脂蛋白MPZ降低，而Sox10和NGFR则增加。接下来，定量修复Schwann细胞标记基因的表达，并发现在C-Jun，Sox2和GDNF中增加。此外，当通过免疫细胞染色和蛋白质印迹检查时，将TTR蛋白定位于高尔基体并细胞外分泌。此外，将C-Jun siRNA引入TGS1降低了C-JUN，TTR显着降低至19％。相反，引入了TTR siRNA以减少TTR，但维持了修复的Schwann细胞表型。最后，当用siRNA降低HSF1基因表达时，在细胞中观察到TTR聚集。 TGS1在CM中进行了重编程，并表现出修复细胞表型，并且发现TTR基因表达通过C-JUN显着增加。在FAP中，由淀粉样蛋白压缩引起的近端神经的轴突损伤会改变schwann细胞以修复雪旺细胞，从而显着增加了TTR基因的表达，这表明在周围子宫内膜上的TTR沉积增强了。

项目成果

期刊论文数量（9）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

TTR アミロイドニューロパチーの初期病変は後根神経節か:MRIでの検討

TTR 淀粉样神经病的初始病变是背根神经节吗：MRI 研究

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
村上龍文;渡部博之;山本　亮;砂田芳秀
通讯作者：
砂田芳秀

Mechanism of neurodegeneration in TTR E61K amyloid neuropathy: electron microscopic study

TTR E61K 淀粉样神经病的神经变性机制：电子显微镜研究

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
Tatsufumi Murakami,Mineykuki Mizuguchi,Kazunori Sango;Shigenobu Tone;Kazuhiko Watabe;Yoshihide Sunada
通讯作者：
Yoshihide Sunada

ヒトトランスサイレチン遺伝子発現は修復シュワン細胞で著増し、神経障害を増強する

人转甲状腺素蛋白基因表达在修复的雪旺细胞中显着增加并加剧神经病变