HSP70の腹膜保護作用に関する研究-特に高糖・高浸透圧下での検討-

HSP70的腹膜保护作用研究——特别是在高糖和高渗透压条件下——

基本信息

  • 批准号:
    07770893
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 0.58万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
  • 财政年份:
    1995
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1995 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

ラットの腹膜中皮細胞の培養は成功し、クローン化細胞株を樹立した。実験には3-5継代の細胞株を使用した。クローン化細胞株へのHSP70遺伝子のtransfectは、種々のlipofectin濃度、種々の遺伝子量を組み合わせて行ったが結果的にはtransfectされなかった。lipofectinを用いる方法以外の方法を試みる必要があると考えられた。クローン化細胞株に糖、D-mannitol、glycerinを用いて高糖負荷、浸透圧負荷を与え培養した。トリパンブルーによるdye exclusion test、培養上清中のLDH放出量、[^3H] thymidineを用いた細胞増殖反応は過去の報告と一致した結果であった。さらに、糖濃度、浸透圧を経時的に上昇させた場合と、一定の糖濃度、浸透圧で培養した場合とで、トリパンブルーによるdye exclusion test、培養上清中のLDH放出量、[^3H]thymidineを用いた細胞増殖反応を比較したが差は認めなかった。また、同じ条件下でHSP70を測定したが細胞障害の程度、細胞増殖反応の程度とHSP70の発現量に相関関係はなかった。本研究の結果からは、HSP70が腹膜中皮細胞に対して保護的に作用する証拠は得られなかった。培養細胞環境におけるHSP70の発現を抑制する因子の検討、また他のHSP familyが同時に発現し何らかの影響を与える可能性を検討すべきであると考えられた。
The culture of peritoneal mesothelioma cells was successful, and the cultured cell lines were established. 3-5 generations of cell lines were used. HSP70 gene transfection, lipofectin concentration and gene quantity in cultured cell lines were combined to produce the results. Lipofectin is used in ways other than those necessary. High glucose load, osmotic pressure load and culture conditions for D-mannitol, glycerol in cultured cell lines The results of the dye exclusion test, LDH release from culture supernatant, and [^3H] thymidine assay were consistent with those reported in the past. In addition, when the sugar concentration and osmotic pressure rise, the sugar concentration and osmotic pressure rise, the dye exclusion test, the LDH emission in the culture supernatant, and the [^3H]thymidine are used, the cell proliferation reaction is compared. Under the same conditions, HSP70 was detected and the correlation between the degree of cell damage, the degree of cell proliferation and the amount of HSP70 was analyzed. The results of this study suggest that HSP70 plays a protective role in peritoneal mesothelioma. A study of factors that inhibit the expression of HSP70 in cultured cells and the possibility of simultaneous expression of HSP70 in other HSP families

项目成果

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