血中及び尿中のトリプシンインヒビターに結合した新奇コンドロイチン硫酸の構造解析

血液和尿液中与胰蛋白酶抑制剂结合的新型硫酸软骨素的结构分析

• 批准号: 07857170
• 负责人: 山田 修平
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Kobe Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07857170/
• 关键词: インター-α-トリプシンインヒビター; ウリナリートリブシンインヒビター; コンドロイチン硫酸; PGP架橋; プロテオグリカン; 硫酸化グリコサミノグリカン; 硫酸化オリゴ糖; ^1H NMR

ヒト血漿より精製したインター-α-トリプシンインヒビター(ITI)およびヒト尿より精製したウリナリートリプシンインヒビター(UTI)について、それぞれのコンドロイチン硫酸鎖とペプチド鎖の結合領域を単離した。調製した結合領域について、FAB-MS分析、コンドロイチナーゼなどの分解酵素による消化物のHPLC分析、構造既知の結合領域オリゴ糖とのコクロマト分析などから、それらの構造を決定した。また、UTIの結合領域については大量に調製が可能であったため、600-MHz ^1H NMR解析を行って厳密に構造を確認した。解析の結果、ITIでもUTIでも以下のような六糖構造を介して、コンドロイチン硫酸鎖がコアタンパク質に結合していることが判明した: -4HexAl-3GalNAc (4-sulfate) β1-4GlcAβ1-3Gal (4-sulfate)β1-3Galβ1-4Xylβ1-O-。この次硫酸化六糖は珍しいGal(4-Sulfate)構造を含んでいる。この構造の報告例はSwarmラットコンドロサルコ-マとクジラ軟骨のコンドロイチン硫酸からのみであり、今回の研究で軟骨だけではなく血漿中や尿中のコンドロイチン硫酸にも存在することが証明できた。しかも、単離された結合領域はこのジ硫酸化六糖のみであり、他の構造をした結合領域はITIやUTIにおいとは存在しないことも分かった。軟骨組織のコンドロイチン硫酸からは様々な構造の六糖が単離されており、今回の結果とは非常に対照的である。コンドロイチン硫酸の糖-タンパク質結合部位における構造の多様性は、各糖残基の修飾構造に依存しており、キシロースの2位のリン酸化、ガラクトースの4位または6位の硫酸化が報告されている。各々の修飾構造は、異なった機能を果たしているのかもしれないし、また異なる機能を持つ糖鎖のサブクラスを反映しているのかもしれない。

The blood samples were isolated from the urine, urine The combination of field data analysis, FAB-MS analysis, enzyme digestion analysis, HPLC analysis, known data analysis and field analysis were used to determine the results. In combination with a large number of field data, UTI and 600-MHz ^ 1H NMR analysis may be necessary to verify the security of the system. After analyzing the results, ITI (4-sulfate) β 1-4GlcA β 1-3Gal (4-sulfate) β 1-3Gal β 1-4Xylβ 1-O-O-was determined by the combination of ITI (4-sulfate) β 1-4GlcA β 1-3Gal (4-sulfate) β 1-3Gal β 1-4Xylβ 1-O -. Hexosaccharides were sulfated and Gal (4-Sulfate) was made to contain maleic acid. This time, we studied the presence of sulfuric acid in the urine in the blood. This time, we studied the presence of sulfuric acid in the urine in the blood. In combination with ITI sulfation of hexosaccharides in the field, and in combination with the UTI in the field, there are significant differences between the two. The bone tissue is very sensitive to sulfuric acid and sulfate. this time, the results show that the results are very sensitive. The combination of sulfated sugars and sulfated sugars creates multiplicity, each sugar residue is modified to be dependent on sulfuric acid, 2 is acidified, and 4 is sulfated and 6 is sulfated. The equipment and equipment of each machine can be used to reflect the performance of the machine.

项目成果

山田修平: "The sulfated carbohydrate-protein linkage region isolated from chondroitin 4-sulfate chains of inter-α-trypsin inhibitor in human plasma." Glycobiology. 5. 335-341 (1995)

Shuhei Yamada：“从人血浆中 α-胰蛋白酶抑制剂的软骨素 4-硫酸盐链中分离出的硫酸化碳水化合物-蛋白质连接区域。” 5. 335-341 (1995)

山田修平: "The Uniform Galactose 4-Sulfate Structure in the Carbohydrate-protein Linkage Region of Human Urinary Trypsin Inhibitor." European Journal of Biochemistry. 233. 687-693 (1995)

Shuhei Yamada：“人尿胰蛋白酶抑制剂碳水化合物-蛋白质连接区域中的均匀半乳糖 4-硫酸盐结构。”欧洲生物化学杂志 233。687-693（1995）