甲殻類の脱皮に伴うカルシウム代謝回転調節因子の探索

寻找甲壳类动物蜕皮过程中钙周转的调节因子

• 批准号: 07858067
• 负责人: 池田 みどり
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Suntory Institute for Bioorganic Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07858067/
• 关键词: アメリカザリガニ; 脱皮; カルシウム; フォスファターゼ; X器官

1 脊椎動物では血清アルカリフォスファターゼ(ALP)が骨代謝マーカーであることを参考にして、アメリカザリガニの体液と皮下組織での脱リン酸化酵素活性の有無を調べた。(1)ザリガニの眼柄を切除して強制的に脱皮周期を短縮した(約10日間)。経日的に体液及び皮下組織から粗酵素溶液を抽出した。市販のALP及び酸性フォスファターゼ(AP)活性測定キット(基質はp-ニトロフェニルフォスフェート)でアッセイを行った。その結果、共にALP,AP活性を認めた。(体液1ml当り,ALP: 0.5B-Lunit, AP: 1.0B-Lunit,皮下組織1匹当り,ALP: 7.5B-Lunit,AP: 15B-Lunit,以上0日目)脱皮前期(8〜10日目)には、体液中ではAPのみが(×2)皮下組織ではAP, ALP共に (AP: ×2.2,ALP: ×5.8)活性が増加した。この結果とザリガニの体液が常に弱酸性(pH6.2)であることから、甲殻類の脱皮に伴うカルシウム代謝にはAPが指標になることが示唆された。(2)脱皮前期の皮下組織から抽出した粗酵素溶液に、脱皮ホルモンであるエクジステロイドのリン酸エステルを加えて酸性条件下で反応した。その結果、脱リン酸化反応が進行し、脱皮ホルモンを検出した。即ち、エクジステロイドリン酸エステルはAPの基質であることが明らかになった。APとカルシウムの直接的な、若しくはエクジステロイドを介する間接的な相関の研究が次の課題である。2 眼柄内にAPを調節する物質の有無を調べた。眼柄から摘出したX器官サイナス腺の生理食塩水抽出物(分子量<3,000画分)を予め眼柄除去したザリガニに注射して、3時間後に体液を採集した。注射前後、両体液中のAP活性を調べた結果、注射後AP活性は3.5倍になった。この傾向は全脱皮周期を通じて認められた。ここに、X器官サイナス腺内にAP活性調節因子の存在を示すことができた。

1 Vertebrate serum ALP bone metabolism ALP (1)The dehiscence cycle of stress is shortened (about 10 days). Daily body fluids and subcutaneous tissues are extracted from the crude enzyme solution. ALP and AP activity determination The results, total ALP,AP activity were identified. (Body fluid 1ml when,ALP: 0.5B-Lunit, AP: 1.0 B-L unit, hypodermic tissue 1 p.m.,ALP: 7.5 B-L unit,AP: 15 B-L unit, above 0 days) In the early stage of desquamation (8 ~ 10 days), AP and AP in body fluids (×2) In hypodermic tissue, AP and ALP activities (AP: × 2.2, ALP: ×5.8) increased. The results showed that the body fluid was weak acid (pH 6.2), crustacean peeling accompanied by AP metabolism index. (2)The subcutaneous tissue in the early stage of peeling is extracted from crude enzyme solution, and the peeling process is carried out under acidic conditions. The results of this study include the following: That is, the basic substance of AP The direct, indirect and related research topics of AP are discussed. 2. The presence or absence of substances regulating AP in the eyestalk The physiological water extract (molecular weight <3,000 ppm) of the eye stalk was extracted and injected. The body fluid was collected after 3 hours. AP activity in body fluid was modulated before and after injection. AP activity was 3.5 times higher after injection. The tendency to complete the defoliation cycle is to recognize the defoliation cycle The existence of AP activity regulators in the organs of the brain and the brain is indicated.