Funktion des DNA-bindenden Proteins CMBF aus Dictyostelium discoideum

Der真核微生物Dictyostelium discoideum enthält in seinem genome eine reithe von nichtviralen retro转座子，die mit hoher Präzision in kurzen Abständen vor Der hinter Transfer-RNA (tRNA)-Genen inserien （TREs, tRNA- gen - assziierte retroelement）。研究了TRE5-A基因的插入机理和定位机理，并对trna - gene进行了分析。与此同时，我们也在研究trna - gen - definededinserteronretroelement zur Verbesserung der Sicherheit bestedergentherapeektoren einbringen zkönnen。本论文的主要研究内容包括：在《自然》杂志中，trna -基因在生物体内的相互作用；在《自然》杂志中，trna -基因的正常表达；在《自然》杂志中，trna -基因的正常表达；在《自然》杂志中，trna -基因的转录和蛋白质之间的相互作用的分子机制。在Zuge dieser Arbeiten habiir in Protein us d.d disideum生物化学分离物和特性分析中，特异性分析了3'-Ende von TRE5-A （dem c - module）结合的dna序列。【关键词】TRE5-A； tRNA-Genen; trna - gene；Außerdem interessiert undie Aufklärung der physiologischen Funktion von CMBF f<e:1> r die Biologie der Wirtszelle von TRE5-A， D. disideum。

Der eukaryontische Mikroorganismus Dictyostelium discoideum enthält in seinem Genom eine Reihe von nichtviralen Retrotransposons, die mit hoher Präzision in kurzen Abständen vor oder hinter Transfer-RNA (tRNA)-Genen inserieren (TREs, tRNA-Gen-assoziierte Retroelemente). Wir untersuchen den Mechanismus der positions- und orientierungsgenauen Insertion von TRE5-A ca. 50 Basenpaare vor tRNA-Genen. Wir hoffen dabei, in der Zukunft das Konzept der tRNA-Gen-determinierten Insertion von Retroelementen zur Verbesserung der Sicherheit bestehender GentherapieVektoren einbringen zu können. Dieses Prinzip ist deshalb besonders interessant, weil tRNA-Gene in jedem Organismus in hoher Kopienzahl vorkommen, weil sich in der Nachbarschaft von tRNA-Genen normalerweise keine anderen Gene befinden, und weil die molekularen Mechanismen der tRNA-Gentranskription und die daran beteiligten Proteine in der Natur stark konserviert sind. Im Zuge dieser Arbeiten haben wir ein Protein aus D. discoideum biochemisch isoliert und charakterisiert, das spezifisch an eine DNA-Sequenz am 3'-Ende von TRE5-A (dem C-Modul) bindet. Das Ziel der in diesem Antrag beschriebenen Arbeiten ist die Charakterisierung der Funktion von CMBF hinsichtlich einer möglichen Funktion in der gerichteten Integration von TRE5-A vor tRNA-Genen. Außerdem interessiert uns die Aufklärung der physiologischen Funktion von CMBF für die Biologie der Wirtszelle von TRE5-A, D. discoideum.