Charakterisierung und Vergleich von Holliday-Struktur auflösenden Proteinen aus thermophilen Archaeen

嗜热古菌霍利迪结构解析蛋白的表征和比较

基本信息

  • 批准号:
    5283098
  • 负责人:
  • 金额:
    --
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    德国
  • 项目类别:
    Research Grants
  • 财政年份:
    2000
  • 资助国家:
    德国
  • 起止时间:
    1999-12-31 至 2004-12-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

Die Linearität doppelsträngiger DNA (ds-DNA) wird im Verlauf von Replikation und Rekombination vorübergehend aufgegeben, und es entstehen drei-armige Y-bzw. vier-armige X-Verzweigungen (Holliday-Strukturen). Solche Verzweigungen sind potentiell letal und blockieren die Verteilung der DNA auf Tochterzellen bzw. die Verpackung der DNA in neu synthetisierte Phagen- und Viren-Hüllen. Die Auflösung solcher Verzweigungen erfolgt durch spezielle Enzyme, den sog. Holliday-Struktur auflösenden Enzymen oder X-Solvasen. Wir möchten X-Solvasen aus verschiedenen Archaeen untersuchen. Die Gene sollen aus Zellen von acht bisher durchsequenzierten und einer noch nicht sequenzierten Spezies durch PCR gewonnen, in E. coli überexpremiert und dann gereinigt werden. Anschließend sollen ihre Substratspezifitäten mit Hilfe synthetischer DNA-Struktur Substraten genau bestimmt werden (Abb. 1). Wegen der auffälligen Sequenzhomologien bei den potentiellen archaealen X-Solvasen bietet sich hier zum ersten mal die Möglichkeit an, die Wirkung von aufeinander aufbauenden Sequenzen auch funktionell zu untersuchen. Die in den anderen "Reichen des Lebens" gefundenen X-Solvasen zeigen untereinander nämlich keine bemerkenswerten Sequenzhomologien.
死亡Linearität doppelsträngiger DNA (ds-DNA)在复制与重组方面的研究进展[j], [j]。vier-armige X-Verzweigungen (holiday - strukturen)。[1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [3]新合成的噬菌体和噬菌体的DNA互包装。Die Auflösung solcher Verzweigungen erfolgt durch spezielle酶,den sog。Holliday-Struktur auflösenden酶奥德x -索尔维森。Wir möchten X-Solvasen aus verschiedenen Archaeen untersuchen。在大肠杆菌<e:1>中进行了实验研究,并对其进行了基因测序。Anschließend sollen ihre Substratspezifitäten mit Hilfe synthetischer DNA-Struktur Substraten genau bestimmt werden (Abb. 1)。Wegen der auffälligen Sequenzhomologien bei den potential - ellen archaealen X-Solvasen bietet et her zum ersten mal die Möglichkeit and, die Wirkung von aufeinder aufbauenden Sequenzen auth functionell zu intersuchen。“生命之母”的生命之母-生命之母-生命之母nämlich生命之母。

项目成果

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