ヒトコンドロモジュリン-I遺伝子の構造決定

人软骨调节蛋白-I基因的结构测定

• 批准号: 08671656
• 负责人: 飯田 寛和
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08671656/
• 关键词: ヒト高分化型軟骨肉腫; クローニング; ヒトChM-IcDNA; ヒトChM-I遺伝子

1)ヒトコンドロモジュリンI(ChM-I)cDNAのクローニングヒト高分化型軟骨肉腫よりmRNAを抽出し、γファージに組み込みcDNAライブラリーを作成した。ウシChM-Iの5′側をプローブにしてライブラリーのスクリーニングを施行したところポジティブクローンを取得した。塩基配列を確認したところ、このクローンは塩基長1.5kbでありヒトChM-Iをコードしていることが明らかとなった。2)ヒトChM-I遺伝子のクローニングClontech社よりEMBL3に組み込まれたヒト胎盤由来のヒトゲノムライブラリーを購入し、ヒトChM-I cDNAをプローブとしてライブラリーのスクリーニングを施行したところ、ポジティブクローン1つを取得した。このクローンの制限酵素地図を作成した後、塩基配列を確認したところ、3′側5.7kbにN端codingexonと次のexonとが含まれていることが確認された。現在このクローンより3′側をgenomic walkingによってクローニングを行っている。

1) The gene expression of ChM-I (ChM-I)cDNA was extracted and the gene expression of ChM-I (ChM-I) cDNA was generated. The 5′ side of Chm-1 was selected. The base length is 1.5kb. 2) The ChM-I cDNA was purchased from EMBL3 and obtained from Clontech. The restriction enzyme sequence was created and the nucleotide sequence was confirmed. The nucleotide sequence was 5.7 kb in length and the nucleotide sequence was confirmed. Now, on the 3′ side of the road, you can see the genomic walking.