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多機能型微小電極によるターゲット細胞の遺伝子発現制御

使用多功能微电极控制靶细胞中的基因表达

基本信息

批准号：
10145209
负责人：
斉藤美佳子
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Tokyo University of Agriculture and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10145209/
关键词：
多機能型微小電極ターゲット細胞イネキチナーゼ

项目摘要

近年、生物機能の解析において、個々の細胞単位での計測・制御が重要になっている。このような解析は、細胞単位でシグナルを与えたり、また同時に個々の細胞からシグナルを得る技術が不可欠である。本研究は、具体的にストレス応答遺伝子であるイネキチナーゼ遺伝子を選び、イネ培養細胞の中の単一の細胞をターゲットし、このターゲット細胞におけるキチナーゼ遺伝子の発現制御を行うことを目的とした。本年度は、次の項目を実施した。1. イネ培養細胞への遺伝子導入と発現効率の解析:導入する遺伝子として、イネキチナーゼのプロモーターにグリーン蛍光タンパク(GFP)のcDNAを挿入したプラスミド(pCHI-GFP)を用いた。pCHI-GFPをターゲット細胞に導入した12時間後にエリシターを作用させ、更に1日後にGFPの蛍光を観察したところ、約22%の細胞からGFPの蛍光が観察された。2. ターゲット細胞のにおけるエリシターによるイネキチナーゼ遺伝子の発現解析:エリシターの作用する第一段階について解析を行った。pCHI-GFPを導入した細胞に、エリシターを細胞内部に直接導入したところ、全ての細胞においてGFPの蛍光は見られなかった。そこで、これらの細胞に対して、細胞外部からエリシターを作用させたところ、約7.6%の細胞からGFPの蛍光が見られた。これらのことから、エリシターの作用する第一段階は、直接細胞内に入って作用するわけではなく、原形質膜を介してシグナルが伝わると考えられた。

In recent years, the analysis of biological functions and the measurement and control of individual cells have become important. The analysis and analysis of the cell unit and the cell unit and the cell unit and the cell unit at the same time can not be attributed to the technology of the cell unit. In this study, the specific details of the research and development of cultured cells are as follows: Cell をターゲットし, Cell このターゲットCell におけるキチナーゼ缝子の発行うことをpurpose とした. This year's projects are completed. 1. Analysis of the efficiency of introduction of cultured cells into cellsーにグリーン蛍光タンパク(GFP)のcDNAをinsertionしたプラスミド(pCHI-GFP)をいた. After the pCHI-GFP sterilized cells were introduced, the effects of 12 hours later were changed and the effect was changed. After 1 day, about 22% of the cells were exposed to GFP. 2.ターゲットcellのにおけるエリシターによるイネキチナーゼ伝子Analysis of の発appear: エリシターの Effect するThe first stage of についてanalysis を行った. pCHI-GFP is introduced directly into the cells, エリシターを is directly introduced into the cells, and all cells are introduced into the cells.そこで, これらのcellular に対して, external からエリシターを effectさせたところ、About 7.6% of cells are からGFPの蛍光が见られた. The first stage of これらのことから, the action of エリシターのする, the direct entry into the cell The role of するわけではなく, the original plasma membrane をmediated してシグナルが伝わると卡えられた.