多機能型微小電極によるターゲット細胞の遺伝子発現制御

使用多功能微电极控制靶细胞中的基因表达

• 批准号: 11132213
• 负责人: 斉藤 美佳子
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tokyo University of Agriculture and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11132213/
• 关键词: 多機能型微小電極; ターゲット細胞; イネキチナーゼ

近年、生物機能の解析において、個々の細胞単位での計測・制御が重要になっている。このような解析は、細胞単位でシグナルを与えたり、また同時に個々の細胞からシグナルを得る技術が不可欠である。本研究は具体的にストレス応答遺伝子であるイネキチナーゼ遺伝子を選び、イネ培養細胞の中の単一の細胞をターゲットし、このターゲット細胞におけるキチナーゼ遺伝子の発現制御を行うことを目的とした。本年度は次の項目を実施した。1.ターゲット細胞におけるエリシターによるイネキチナーゼ遺伝子の発現解析:エリシターを作用させた場合、セカンドメッセンジャーとして知られている[Ca^<2+>]iが変化するかどうか調べた。その結果エリシターを添加後、直ちに[Ca^<2+>]iの一過的な上昇が認められた。また、この変化はCa^<2+>チャンネルブロッカーであるVerapamilを作用させた場合には上昇が見られなかった。このことから、エリシターの添加により[Ca^<2+>]iが上昇し、キチナーゼ遺伝子が発現すると考えられた。そこで次にエリシターを作用させずに直接細胞内にCa^<2+>を導入した。その結果、約50%の細胞からキチナーゼ遺伝子の発現が観察された。2.ターゲット細胞への電気的シグナル印加による[Ca^<2+>]i変化の解析:電気的シグナルを印加させて、[Ca^<2+>]iを電気的に制御可能か解析を行なった。その結果、細胞膜に5mV程度かかることにより、[Ca^<2+>]iを10倍以上増加させることが可能であった。この変化もVerapamilの添加により阻害されたことから、電圧を印加することで細胞外のCa^<2+>がCa^<2+>チャンネルを通って細胞内に流入したものと考えられた。

In recent years, the analysis of biological functions, the measurement and control of individual cell units have become important. The analysis of this problem, cell location, cell The purpose of this study is to select specific Nissleskta genetic vectors, select single cells in cultured cells, and control the occurrence of genetic vectors in these cells. This year's first project was implemented. 1. The analysis of the occurrence of the gene in the cell: the action of the gene in the cell, the change of the gene in the cell, the change of the gene in the cell. After the addition, the [Ca^<2+>]i and the rise of the result are recognized. In this case, the effect of Verapamil on Ca^<2+> and Ca^<2+> is increased. This is the first time I've ever seen a person who's been in a relationship with someone else. The effect of Ca^<2+> on the cells was studied. As a result, about 50% of the cells were detected. 2. The analysis of the change of [Ca^<2+>]i in the electric field of the cell: the analysis of the change of [Ca ^<2+>]i in the electric field. The result is that the cell membrane is 5mV high,[Ca^<2+>]i is 10 times higher, and the cell membrane is 5 mV high. The addition of Verapamil prevents the influx of Ca^<2 +> into the cell.

项目成果

Mikako Saito: "Control of Ca^<2+> Influx into a Single Rice Cell with an Electric Signal."Electrochemistry. (in press).

Mikako Saito：“用电信号控制 Ca^2 > 流入单个水稻细胞。”电化学。

Hidekazu Sotoyama: "Control of the Cross Membrane Potential of a Cultured Tobacco Cell and Simultaneous Measurement of the Electrical Impedance of Its Membrane." Electrochemistry. 67(1). 18-21 (1999)

Hidekazu Sotoyama：“控制培养烟草细胞的跨膜电位并同时测量其膜的电阻抗。”

Hideaki Matsuoka: "Control of the Quantity and the Timing of Microinjection into a Bio-Cell with Multifunctional Microelectrode"Electrochem. Acta.. 44. 3801-3807 (1999)

Hideaki Matsuoka：“用多功能微电极控制生物细胞显微注射的数量和时间”Electrochem。

Hideaki Matsuoka: "Effects of a pulsing electric signal on the Cross Membrane Potential and the Cell Division Potentiality of a Single Cell of Tobacco"Bioelectrochem. Bioenerg.. 49. 65-72 (1999)

Hideaki Matsuoka：“脉冲电信号对烟草单细胞跨膜电位和细胞分裂电位的影响”生物电化学。

Mikako Saito: "pH-Microelectrode-micropipette system for the measurement of Enzyme Reaction in Picoliter Space of a Living Plant Cell."Anal. Chim. Acta.. 404(2). 223-229 (2000)

Mikako Saito：“用于测量活植物细胞皮升空间内酶反应的 pH 微电极微移液器系统”。