权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

蛍光グルコースを用いる1分間マイクロバイオアッセイ法の開発

开发使用荧光葡萄糖的 1 分钟微生物测定方法

基本信息

批准号：
13760234
负责人：
斉藤美佳子
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Tokyo University of Agriculture and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13760234/
关键词：
蛍光グルコースマイクロバイオアッセイ

项目摘要

我々は、食中毒予防等の食品衛生管理の重要性から、生きた微生物の検出について、検出原理・装置の開発研究を行ってきた。その中で検出対象が「生きた状態」であることからその栄養代謝経路に注目をし、もっとも一般的な栄養源であるグルコースを基質として蛍光剤2-[N-(7-nitrobenz-2-oxa-1,3-diazol-4-yl)amino]-2-deoxy-D-glucose (2NBDG)を開発した。本研究では、生きた細胞を1分間という迅速に、かつ1個体の細胞を検出出来る手法の開発を目指している。(1)各種微生物への2NBDG法の応用これまで主に試験菌としていた大腸菌に加え、実際に食品から単離された大腸菌群や食中毒菌(Salmonella enteritidis、Salmonella typhimurium, Vibrio mimicus、Listeria monocytogenes、Staphylicoccus aureus, Yersinia enterocolitica, Bacillus cereus)への2NBDG取り込みを調べた。その結果、試験菌41種類のうち35種類の菌で取り込みが見られ、1分間という短い取り込み時間で蛍光顕微鏡観察に十分な蛍光強度を示した。以上の結果は、2NBDG法の食品衛生面での有用性を示すものと期待される。(2)試料調整、捕捉法の改良サンプル吸引アダプタの開発と、オートステージ移動プログラムを作成した。顕微鏡視野内に収まる径を複数作成した本アダプタを用いることで、全サンプルの確実なフィルター捕捉を可能にした。また、オートステージプログラム使用により観察の自動化が進み、観察時間が短縮された。(3)飲料水試料中の生菌の1分間アッセイ飲料水(ウーロン茶、アセロラドリンク)に大腸菌を添加し、2NBDG法による検出を行った。その結果、ウーロン茶での試験では、3〜5個以内の細胞でも検出することが可能であり、従来法であるコロニーカウント法との高い相関性を得ることが出来た。(4)標準プロトコールの完成昨年度作成したドラフトを基に、上記の結果を加えたプロトコールを作成した。

The importance of food hygiene management, food poisoning prevention, etc., the importance of food hygiene management, the production of microorganisms, and the study of principles and devices. In the middle of the day, there is a picture of "health status". In the middle of the day, there is a lot of attention on the road, and there is a lot of attention on the road, and the general source is that you need to pay attention to the general situation. [n-(7-nitrobenzyl-2-sulfonyl) amino]-2-deoxy-D-glucose (2NBDG) is open. In this study, the cells of health workers and health workers were tested quickly within 1 minute, and one body cell came out to use the method to open the finger to get sick. (1) all kinds of microbiological 2NBDG methods were used to detect the toxic bacteria (Salmonella enteritidis, Salmonella typhimurium, Vibrio mimicus, Listeria monocytogenes, Staphylicoccus aureus, Yersinia enterocolitica, Bacillus cereus) by using the 2NBDG of the main bacteria, the bacteria, the bacteria, and the food products of the international food market. According to the results of the test, the 35 types of bacteria, 41, and 35 types of bacteria were selected, and the light intensity of 10% light intensity was detected by photospecific microanalysis in 1 minute. The above results show that the usefulness of food hygiene noodles by 2NBDG method shows that you are looking forward to it. (2) to improve the method of fishing and trapping, to attract people to open their homes and to move them to make a deal. Make a copy of the path in the field and make sure that it is possible to capture it. We need to monitor the progress of self-customization and the short-term monitoring of time by using the monitoring system. (3) in the raw water, the raw water (tea, etc.) was added to the raw water, and the 2NBDG method was used to check out the raw water. According to the results of the test, the results showed that there were no more than 3 or 5 samples of tea products, and that no more than 3 or 5 of them reported that they were not allowed to buy food, and that they were able to do so. (4) the standard has been completed for the year of last year, and the results of the previous year have been added to make it possible.