組織修復制御因子の同定と癌の組織修復異常の解析

组织修复调节因子的鉴定和癌症组织修复异常的分析

• 批准号: 10152216
• 负责人: 岡田 明子
• 金额: $ 3.07万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10152216/
• 关键词: 組織修復; マトリックスメタロプロテアーゼ; ノックアウトマウス; プロモーター; がん; 浸潤転移; MT1-MMP; LacZ

組織修復のマーカー因子として、組織修復の過程に段階を追って順序よく発現する数種のマトリックスメタロプロテアーゼ(MMP)があげられる。そのうち、受傷直後より発現し、治癒によりその発現がみられなくなるMMP遺伝子で、また癌の浸潤転移に関与する知見が集積されつつある膜型MMP(MT1-MMP)に注目して、以下の検討を行った。1) マウス129ストレインのゲノム遺伝子ライブラリーをスクリーニングして、MT1-MMP遺伝子およびその上流約10kbを得た。MT1-MMP遺伝子の上流約3kbをシークエンスして、MT1-MMP遺伝子はTATAlessプロモーターで、シスエレメントの解析では明らかなTREは存在しなかった。2) MT1-MMP遺伝子を発現する細胞、あるいはしない細胞に、MT1-MMP遺伝子のプロモーター領域にルシフェラーゼをレポータ遺伝子として構築した遺伝子を導入したところ、MT1-MMP遺伝子を発現する細胞でプロモーター活性を得られた。しかしながら現在までのところ、in vitroでMT1-MMP遺伝子を直接的、あるいは間接的に制御する因子は同定出来ておらず、引き続き同定を試みる。3) 第1エキソン途中から第4エキソンまでをLacZ遺伝子、Neo遺伝子に置き換えたターゲットベクターを構築してES細胞に導入し、目的の細胞を得た。現在までに、ヘテロマウスが得られ、ヘテロマウスでのLacZ遺伝子の発現と、正常マウスでのプロモーター遺伝子の発現を比較検討中である。

Tissue repair factors, tissue repair process stages, and sequence of several types of tissue repair factors (MMP). In addition, the following studies were conducted to investigate the relationship between MMP gene expression, cancer invasion and metastasis. 1)The 129-bit version of the MT1-MMP sequence was obtained. MT1-MMP gene upstream about 3kb, MT1-MMP gene TALess analysis, analysis of TRE is clear 2)MT1-MMP gene expression in cells, cells, MT1-MMP gene expression in cells. The MT1-MMP gene is directly and indirectly controlled by the same factor. 3)The 1st and 4th generation of ES cells were introduced into the cells and the target cells were obtained Now we are comparing the occurrence of LacZ gene with that of normal LacZ gene.

项目成果

Kusagawa H: "Expression and degeneration of tenascin-C in human lung cancers" Br.J.Cancer. 77. 98-102 (1998)

Kusakawa H：“人类肺癌中生腱蛋白-C 的表达和变性”Br.J.Cancer。

Kinoshita T: "TIMP-2 Promotes Activation of Progelatinase A by Membrane-type 1 Matrix Metalloproteinase Immobilized on Agarose Beads" J.Biol.Chem.273. 16098-16103 (1998)

Kinoshita T：“TIMP-2 通过固定在琼脂糖珠上的膜 1 型基质金属蛋白酶促进原明胶酶 A 的激活”J.Biol.Chem.273。