新規がん抑制遺伝子drsの機能解析

新型抑癌基因drs的功能分析

• 批准号: 10152228
• 负责人: 井上 寛一
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10152228/
• 关键词: がん抑制遺伝子; 大腸癌; drs

我々がラット初代培養細胞cDNAライブラリーから分離したdrs遺伝子はC端に膜貫通ドメイン、N端に接着因子であるセレクチンファミリーに保存されている補体結合モチーフを持ち、種々の癌遺伝子によってそのmRNAの発現がdownregulateされること、およびラット細胞株に強力なプロモーターのもとで高発現させるとv-srcなどの癌遺伝子によるトランスフォーメーションを抑制することから細胞癌化に対して抑制的に働く新規癌抑制遺伝子であると考えられる。 我々はdrs遺伝子がヒト癌の発生においても癌抑制遺伝子として機能しうるかどうかを検討するためにdrsのヒトホモログを分離し大腸癌など種々のヒト癌細胞株においてもdrs mRNAの著しい発現低下が認められることを明かにしてきた。この1年間、我々はdrs遺伝子の機能と細胞癌化における役割を主としてヒト癌細胞において解析し以下の成果を得た。1. drs遺伝子は種々のヒト癌細胞株の足場非依存性増殖能を抑制する活性を持つことがわかった。2. この抑制活性にはdrsの膜貫通領域の外側と内側の両方が必要であった。3. drs発現細胞では非接着培養条件下でG1/S期進行とサイクリンA mRNAの発現が抑制されていた。4. Flag-tag導入drsやdrs蛋白に対するポリクローナル抗体を用いて、drs蛋白がN端側を外側として細胞膜上にでていること、およびdrs蛋白と結合する分子量70Kの蛋白が存在することを明らかにした。5. ヒト癌細胞株だけでなく実際のヒト癌組織におけるdrs遺伝子の発現をin situ hybridization法によって検討したところ正常大腸組織ではdrs遺伝子の発現が認められるのに対して、現在までに調べたほとんどの大腸癌(colon adenocarcinoma)組織(5/5)においてdrs mRNAの発現が著しく低下していた。

The expression of cDNA in primary cultured cells is downregulated by the C-terminal membrane penetration factor and the N-terminal adhesion factor. The cell line is a potent tumor suppressor. The tumor suppressor gene is a new tumor suppressor gene. The expression of drs mRNA in colorectal cancer cell lines was significantly lower than that in normal colorectal cancer cells. During the past year, we have achieved the following results in the analysis of the function of drs gene and cell carcinogenesis. 1. Drs-related genes inhibit the growth of tumor cell lines in a field-independent manner. 2. This inhibition activity is necessary for both the outer and inner sides of the membrane penetration field. 3. DRS-producing cells were inhibited from G1/S phase under non-continuous culture conditions. 4. Flag-tag introduced drs and drs proteins are used to bind to antibodies, drs proteins are located on the N-terminal side of the cell membrane, and proteins with molecular weight of 70K are present. 5. The expression of drs mRNA in cancer cell lines was detected by situ hybridization method. The expression of drs mRNA in normal colorectal tissues was detected by situ hybridization method. The expression of drs mRNA in colon adenocarcinoma tissues was detected by situ hybridization method.

项目成果

S.Kyo et al.: "Expression of human telomerase subunits in ovarian malignant, borderline and benign tumors." Int.J.Cancer. (in press). (1999)

S.Kyo 等人：“人端粒酶亚基在卵巢恶性、交界性和良性肿瘤中的表达”。