Drs遺伝子機能と足場非依存性増殖の分子機構

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我々が分離したv-srcによるトランスフォーメーションを抑制する活性を持つ新規癌抑制遺伝子drsはヒト癌細胞株においてもサイクリンAの発現抑制を介して足場非依存性増殖を抑制する。またこの抑制活性にはdrsの細胞外領域の3つのconsensus repeat(CR)と細胞内領域の両方が必要であることをこれまでに明らかにしている。本年度、我々はdrs遺伝子による癌化抑制機構と実際のヒト癌発生におけるこの遺伝子の役割を解析し以下の成果を得ている。1.様々なヒト癌組織におけるdrs遺伝子の発現を調べ、現在までに大腸癌、肺腺癌、前立腺癌、ATLのリンパ腫の悪性組織でdrs mRNAの発現抑制が高頻度で起こっていることを明らかにした。2.Drs蛋白の機能を明らかにするためにdrsの細胞内領域とマルトース結合蛋白との融合蛋白を大腸菌で作製し精製した。このリコンビナント蛋白を用いてdrsと細胞内で結合する蛋白の同定を行っている。3.drsの発現の認められないヒト癌細胞株T24にdrs遺伝子を導入しdrs発現に依存して発現誘導される遺伝子の検索を行いJNK,DNA-PK,IL-10など複数の遺伝子を見い出した。4.新しいsplicing variantを含む2種類のmouse drs cDNAをクローニングし両方のdrs mRNAが正常組織で発現していること、癌化抑制には3つのCRがそろっていることが必要であることを明らかにした。5.drsの1st exonを含むmouse genomic cloneを分離し、ターゲッティングベクターに組み込んだ後、ES細胞に導入しdrs欠損mouseを作製中である。上記の結果から様々なヒト癌組織においてもdrsの発現抑制と悪性化形質の発現が密接に関連していることが明らかになってきた。drs蛋白が細胞外および細胞内で結合する蛋白を同定することによって癌化形質の発現抑制に関わる経路を明らかにしてゆきたい。さらに現在作製中のdrs KO mouseおよびTg mouseの解析によって個体レベルでの癌発生におけるdrs遺伝子の役割と種々の正常細胞においてdrsがどのような機能を担っているのかを明らかにしてゆきたい。