Drs遺伝子機能と足場非依存性増殖の分子機構

Drs基因功能及贴壁依赖性生长的分子机制

• 批准号: 13216049
• 负责人: 井上 寛一
• 金额: $ 3.01万
• 依托单位: Shiga University of Medical Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13216049/
• 关键词: がん抑制遺伝子; 足場非依存性増殖; drs遺伝子

本年度、我々はdrs遺伝子による癌化抑制機構と実際のヒト癌発生におけるこの遺伝子の役割を解析し以下の成果を得た。1.実際のヒト癌組織におけるdrs遺伝子の発現と悪性化との関連をin situ hybridization法、Northern法、Southern法によって検討した。肺癌と前立腺癌で検討し低分化型肺腺癌、肺小細胞癌、前立腺癌、成人T細胞白血病(ATL)患者のリンパ腫においてもdrs mRNAの著しい発現低下が高頻度で認められることを明らかにした。2.Drs蛋白の機能を明らかにするためにFlag-tagを導入したdrsを高発現させる実験系を確立し、抗Flag抗体による免疫沈降法とペプチドマスフィンガープリント法を用いてDrsと結合する蛋白の検索と同定を行ない現在までに複数のDrsと共沈する蛋白を同定した。これらのうち2つは特異抗体による免疫沈降法によってERでの蛋白の発現調整に関わるGRP78/BiPとα-glucosidase-αsubunitであると確定した。現在これらのDrs結合蛋白の機能とDrsの機能発現との関連について解析を行っている。3.drs KO mouseを作製するためにdrs genomic cloneを分離し、Null-typeおよびConditional-typeの2種類のターゲッティングベクターを作製した。これらのベクターをES細胞株へ導入後複数のdrs KO ES細胞クローンを得てマウス胚に移植しキメラマウスを複数ライン得ることに成功した。現在これらキメラマウスと野生型マウスとの交配を行い生殖系細胞でdrsがKOされているマウスを作製しその表現型を解析している。4.Sushi motifを欠くmurant drsを高発現するTgマウスを作製し、その表現型と癌形質の発現に対する影響を解析している。

This year, we have achieved the following results in the analysis of DRS gene expression, cancer suppression mechanism and actual cancer development. 1. In situ hybridization, Northern and Southern methods were used to investigate the relationship between the development and characterization of DRs in real cancer tissues. Lung cancer, advanced adenocarcinoma, and adult T cell leukemia (ATL) patients have low expression of drs mRNA and high frequency of DRs mRNA. 2. The function of Drs protein is clearly defined. Flag-tag is introduced. Drs protein is identified. Anti-Flag antibody is identified by immunosedimentation. GRP78/BiP α-glucosidase-αsubunit was identified by immunoprecipitation for ER protein expression. Now, the function of Drs-binding protein and the function of Drs-binding protein are analyzed. 3. drs KO mouse is controlled by two types of drs genomic clone: Null-type and Conditional-type. After the introduction of the ES cell line, a plurality of drs KO ES cells were successfully transplanted. Now, the phenotype analysis of germline cells is carried out in the wild type. 4. Sushi motif affects the development of high Tg, phenotype and cancer.

项目成果

Q.Li et al.: "Link of a new type of apoptosis -inducing gene ASY/Nogo-B to human cancer"Oncogene. 20. 3929-3936 (2001)

Q.Li等人：“新型凋亡诱导基因ASY/Nogo-B与人类癌症的联系”癌基因。

T.Kawai et al.: "Isolation of a novel mouse variant of the drs tumor suppressor gene"Cancer Letters. (in press).

T.Kawai 等人：“drs 肿瘤抑制基因的新型小鼠变体的分离”《癌症快报》。

T.Osugi et al.: "Cardiac-specific activation of signal transducer and activator of transcription 3 promotes vascular formation in the heart"Journal of Biological Chemistry. 277. 6676-6681 (2002)

T.Osugi 等人：“信号转导器和转录激活剂 3 的心脏特异性激活促进心脏血管形成”《生物化学杂志》。

A.Suzuki et al.: "CIS3/SOCS3/SSI3 plays a negative regulatory role in STAT3 activation and intestinal inflammation"Journal of Experimental Medicine. 193. 471-482 (2001)

A.Suzuki 等人：“CIS3/SOCS3/SSI3 在 STAT3 激活和肠道炎症中发挥负调节作用”实验医学杂志。

S.Haraguchi et al.: "Transcriptional regulation of Mesp1 and Mesp2 genes : differential usage of enhancers during development"Mechanisms of Development. 108. 59-69 (2001)

S.Haraguchi 等人：“Mesp1 和 Mesp2 基因的转录调控：发育过程中增强子的差异使用”发育机制。