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ライブラリー・サブトラクション法による転移関連遺伝子の単離

通过文库消减法分离转移相关基因

基本信息

批准号：
10152239
负责人：
伊藤彰彦
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

マウス・メラノーマ細胞株B16の亜株のうち、実験的転移能と自然転移能のいずれをも有するBL6細胞と、実験的転移能は有するが自然転移能は有しないF10細胞との間でcDNAライフラリーのサブトラクションを行って、自然転移能獲得に正の働きをしている遺伝子群の単離を試みた。BL6細胞において高発現する遺伝子を現在までに20数種単離した。そのうち次の遺伝子について解析を進めている。コネキシン26、プロテイン・フォスファターゼ2Aの制御サブユニット、Phakinin(中間径フィラメント)、アセチルCoAトランスポーター、b-Myc、I-κbに結合する酵母遺伝子のマウス・ホモローグ、Zn・フィンガー・モチーフを持つ新規遺伝子。現在までの成果を以下に列挙する。1) コネキシンは自然転移能獲得に正の働きをしうる。この機能はコネキシンのサブタイプによる特異性があり、正常細胞(血管内皮細胞等)とのheterotypicなギャップ・ジャンクション形成能に依存するものと思われた。2) ヒト肺癌症例のスクリーニングで、転移ステージとコネキシン遺伝子発現との間に正の相関が見い出された。3) プロテイン・フォスファターゼ2A制御サブユニットの発現亢進は、BL6細胞のゲノム上第一イントロンにレトロトランスポゾンの挿入があるからで、そのアリルに由来する翻訳産物はN末に約70アミノ酸の欠失を生じていた。4) このフォスファターゼは焦点接着構成蛋白(インテグリンやパキシリン)と結合した。5) このフォスファターゼは細胞外基質に対するF10及びBL6細胞のspreading、migration、invasion能の評価において抑制性に機能した。即ち、細胞外基質-インテグリ系を介して細胞内に入るシグナルに対してフォスファターゼが負の制御を行っているものと考えられた。

Cell strain B16 has the ability to migrate naturally and naturally. Cell strain B16 has the ability to migrate naturally and F10 has the ability to migrate naturally and naturally. BL6 cells are highly developed and now contain more than 20 species of DNA. The analysis of the content of the text is carried out in the following ways: The new regulations are contained in: The results are listed below. 1)A natural shift can be made. These functions are dependent on the specificity and heterotypic properties of normal cells (vascular endothelial cells, etc.). 2)The incidence of lung cancer is closely related to the development of lung cancer. 3)In addition, the production of protein and protein in BL6 cells was increased by 2A, and the production of protein and protein in BL6 cells was increased by 70%. 4)This is the first time I've ever seen a person who's been in a relationship with someone else. 5)The expression of these genes in F10 and BL6 cells was evaluated by the expression of the extracellular matrix, migration and invasion. That is, the extracellular matrix--the system that mediates the intracellular process--is the key to controlling the growth of cells.