PU.1 過剰発現による赤白血病細胞の分化阻害とアポトーシス誘導の分子機構

PU.1过表达抑制红白血病细胞分化及诱导凋亡的分子机制

• 批准号: 10152262
• 负责人: 及川 恒之
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Sasaki Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10152262/
• 关键词: PU.1; Ets; がん遺伝子; 細胞増殖; 分化; アポトーシス; 白血病

PU.1過剰発現によるMEL細胞の分化阻害・増殖抑制・アポトーシス誘導の分子機構につき、本年度は以下の点を明かにした。1) PU.1過剰発現によりMEL細胞に誘導される増殖抑制の分子機構を知るため、増殖関連遺伝子c-myc,c-myb,c-fosプロモーターに及ぼすPU.1の過剰発現の影響をレポーターアッセイにより検討した。各レポーター遺伝子とともにets-1あるいはets-2発現ベクターを導入すると、それらのプロモーター活性はdose dependentに増強されたが、レポーター遺伝子とともにPU.1発現ベクターを導入するとレポーター遺伝子の活性は逆に量依存性に抑制された。この抑制はEts結合配列を介する競合の結果ではなく、generalなものであった。2) PU.1過剰発現によりMEL細胞に誘導されるアポトーシスと、赤血球の生存に関与する転写因子GATA-1のDNA結合能の消失の間に強い相関を見い出した。この抑制はアポトーシス誘導細胞内に存在する分子量20kDa以下の因子が関与すると推測される結果を得ていることから、現在、この蛋白質の生化学的単離同定を目指している。3) われわれは、PU.1には転写補助因子であるCBPが結合することを見い出したが、欠損変異株を用いたGSTpull down assayにより、PU.1の転写活性化ドメイン(74〜122a.a.)とCBPのC末のE1A結合領域とオーバーラップする部位(1283〜1915a.a.)とが結合することが分かった。また、レポーターアッセイからCBPはPU.1の転写補助因子としても作用することが明らかとなった。現在、CBPを親のMEL細胞およびPU.1導入MEL細胞にトランスフェクトして、上記の現象の誘導にどのような効果があるかを検討している。

The PU.1 process shows that the differentiation of MEL cells inhibits colonization and inhibits colonization. The leading molecular mechanism is involved, and the following measures will be made clear this year. 1) the molecular mechanism of PU.1 screening, the molecular mechanism of colonization inhibition, the molecular mechanism of colonization inhibition, the molecular mechanism of colonization inhibition, the molecular mechanism of colonization inhibition, the molecular mechanism of colonization inhibition, the molecular mechanism of colonization inhibition, the molecular mechanism of colonization inhibition, the molecular mechanism of colonization inhibition, the molecular mechanism of colonization inhibition, the molecular mechanism of colonization inhibition, the molecular mechanism of colonization inhibition, the molecular mechanism of colonization inhibition, the molecular mechanism of colonization inhibition, the molecular mechanism of colonization inhibition, the molecular mechanism of colonization inhibition, the molecular mechanism of colonization inhibition, the molecular mechanism of colonization inhibition, the molecular mechanism of colonization inhibition, the molecular mechanism of colonization inhibition, the molecular mechanism of colonization inhibition, the molecular mechanism of colonization inhibition, the molecular mechanism of colonization, the molecular mechanism of colonization In each case, the ets-1 data showed that the activity of the dose dependent was significantly higher than that of the PU.1, and that the activity of the PU.1 was significantly higher than that of the control. The combination of Ets and general suppresses the results of this column. The results show that you need to know how to do this. 2) PU.1 filter shows that the combination of MEL cell markers, red blood cell survival factor and GATA-1 gene DNA can make a positive response to each other. The molecular weight of 20kDa is lower than the molecular weight of DNA. The results show that the molecular weight of protein is similar to that of biochemistry. 3) the cofactor of writing cofactor (CBP) combined with the combination of cofactor (74~122a.a) and GSTpull down assay (74~122a.a.) The CBP

项目成果

T.Yamada, et al: "Reduction of DNA binding activity of the GATA-1 transcription factor in the apoptotic process induced by overexpression of PU.1 in murine erythroleukemia cells" Experimental Cell Research. 245. 186-194 (1998)

T.Yamada 等人：“小鼠红白血病细胞中 PU.1 过度表达诱导的细胞凋亡过程中 GATA-1 转录因子的 DNA 结合活性降低”实验细胞研究。

F.Kihara-Negishi, et al: "Down-regulation of c-Myc and Bcl-2 gene expression in PU.1-induced Apoptosis in murine erythroleukemia cells" International Journal of Cancer. 76. 523-530 (1998)

F.Kihara-Negishi 等人：“PU.1 诱导的小鼠红白血病细胞凋亡中 c-Myc 和 Bcl-2 基因表达的下调”《国际癌症杂志》。