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無機炭素輸送の制御機構

无机碳传输的控制机制

基本信息

批准号：
10170219
负责人：
福澤秀哉
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

レポーター遺伝子(アリルスルファターゼ遺伝子)の構造遺伝子とベータ2-チューブリン最少プロモーターに炭酸脱水酵素遺伝子CAH1の5'上流を連結して.緑藻クラミドモナスに形質転換を行ったところ、CO_2濃度変化に応答したレポーター遺伝子の発現が認められた。この遺伝子上流域には、高CO_2条件で機能するサイレンサーと低CO_2条件で機能するエンハンサーという2種類の調節領域を見いだした。クラミドモナスから、高CO_2要求株(培養中のCO_2濃度が空気レベルの0.04%に低下すると生育速度が低下する株)を遺伝子タギング法により7株単離した。得られた変異株では、無機炭素濃縮機構(CCM)を担うタンパク質をコードする遺伝子や、CO_2濃度の低下を細胞が感知しそからCCMの発現誘導が引き起こされるまでの、シグナル伝達系路に関与する遺伝子が変異していると考えられた。そこで、クラミドモナスからインデックスPACゲノムライブラリーを構築し、これを形質転換して変異を相補するクローンを単離した。無機炭素輸送能が低下したC1株については、20kbの挿入断片をもつPACクローンが変異を相補したので、このゲノム領域に輸送関連遺伝子が存在する可能性が高い。また、CCM関連遺伝子が誘導されないC16株に形質転換を行い、変異を相補するゲノムDNA断片を、NITlをプローブとして単離し、その原因遺伝子の塩基配列を決定した。この遺伝子は、これまでには報告のない新規な遺伝子であった。

The structural gene of the complex gene (the complex gene) is linked to the 5'upstream of the enzyme CAH1. The change of CO_2 concentration and the occurrence of algae in the environment are discussed. 2 kinds of regulatory domains are found in the upper part of the river basin under high CO_2 and low CO_2 conditions 7 strains were isolated from the plants with high CO_2 requirement (0.04% CO_2 concentration in culture, low growth rate, low fertility rate). The results showed that CCM was responsible for the change of CO_2 concentration, and the decrease of CO_2 concentration was detected by the cells. CCM was induced by CCM. In addition to the above, the PAC must be constructed in such a way that the quality of the product is different from that of the original product. Inorganic carbon transport energy is low in C1 plants, and 20kb fragments are added to PAC to complement each other. There is a high possibility that transport-related genes exist in this field. C16 strain was induced by CCM-related genes, and the nucleotide sequence of the genes was determined by DNA fragment, NIT1, and nucleotide sequence. This is the first time I've ever seen a woman.