ミトコンドリア蛋白質の輸送反応及び機能発現における分子シャペロンの役割

分子伴侣在线粒体蛋白质转运反应和功能表达中的作用

• 批准号: 10172202
• 负责人: 斧 秀勇
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Yamagata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10172202/
• 关键词: ミトコンドリア; 蛋白質膜透過; 分子シャペロン; 熱ショック蛋白質; ミトコンドリア内膜; ミトコンドリアマトリックス

これまで報告しているように、我々は兎網状赤血球細胞質画分より分子シャペロンと考えられる28kD細胞質因子(CF28)の単離に成功し、CF28がMt蛋白質前駆体-Mt間の認識結合の過程に関与している事を証明した。そこでラット肝Mtを用いた系で輸送、仕分け反応、及びMt定着後の蛋白質の機能発現に分子シャペロンがどのように関わっているかを解析したところ、これまで以下の結果を得ることができた。1) 細胞質因子CF28がこれまでに報告されている細胞質分子シャペロンMSFなどと異なる因子であることが明らかになり、その作用機作を詳しく解析してきたが、その研究の過程で、細胞質因子CF28と異なるN-エチルマレイミドに感受性を示さない新しい因子をラット肝細胞質画分中に見い出した。しかも、その因子はプレシークエンス型前駆体蛋白質のみに特異的な因子と考えられた。また、この新因子は前駆体を輸送反応に有利な形状に維持するタイプの因子ではなく、プレシークエンス型前駆体とミトコンドリア間の認識・結合に関与する因子と考えられた。2) 膜間区画酵素であるコプロポルフィリノーゲン酸化酵素(CPO)の輸送反応系を確率した。さらに、そのプレシークエンス部分のC末端にDHFRを融合させたキメラ蛋白も調製し、仕分け反応についての解析に利用した。その結果、CPO前駆体は中間体を経て、膜間区画に輸入されることが明らかになった。また、その高次構造形成は中間体の段階でおきていることが示唆された。したがって、膜透過反応と同時にある程度高次構造の形成がおきていると考えられる。現在、高次構造形成の因子がミヨコンドリアのどの画分に存在するか検討中である。以上の成果より、未知の可溶性因子をラット肝細胞質画分中に発見することができた。また膜間区画における蛋白質高次構造形成に関して貴重なヒントが得られた。

これまで Report しているように、I 々は reticulocyte cytoplasm analysis よりmolecule シャペロンとtest えられる 28kD cytoplasmic factor (CF28) has been successfully separated, and CF28 has been proven to be successful in the process of understanding and binding between the Mt protein precursor and Mt. The そこででラット liver Mt is transported by the system, divided and reacted, and the protein function is expressed as a molecule after the Mt is fixed.ャペロンがどのように关わっているかをanalytics したところ、これまでで下の resultsをget ることができた. 1) Cytoplasmic factor CF28がこれまでにreportされているcytoplasmic moleculeシャペロンMS Fなどとなるfactor であることが明らかになり、そのaction mechanismを detailしくanalyticしてきたが, その Research Process で, Cytoplasmic Factor CF28 とISO なるN-エチルマレThe イミドにsensitivity をshows the さない新しいfactor をラットliver cytoplasm is divided into に见い出した. The しかも, the その factor はプレシークエンス type pre-body protein のみに is the specific な factor と卡えられた.また、この新factor は槆体をTransportation reaction にFavorable shape にMaintenance するタイプのfactor ではなく、プRecognition of the レシークエンス-type former cylindrical body とミトコンドリア间の・combination of に关 and するfactor と考えられた. 2) The accuracy of the delivery and reaction system of the intermembrane compartmental enzyme CPO is high.さらに、そのプレシークエンス partially のC-terminal DHFR fusionさThe せたキメラprotein もmodulationし, the official けreflection についてのanalytic にutilizationした.そのRESULTS, CPO pre-CPO body は intermediate を経て, intermembrane area に input されることが明らかになった.また, そのHigh-order structure is formed and のsteps of intermediates are shown instructing された.したがって, membrane permeability reaction と and にある degree of high-order structure の formation がおきていると考えられる. Now, the factor that forms the higher-order structure is the existence of the element that forms the higher-order structure. The above results show that the unknown soluble factor was analyzed in the liver cytoplasm of the liver cytoplasm. The intermembrane area is drawn and the protein higher-order structure is formed, and the high-order structure is formed.