权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

小胞体における蛋白質膜透過の一分子観察

内质网蛋白质膜渗透的单分子观察

基本信息

批准号：
16657044
负责人：
阪口雅郎
金额：
$ 1.92万
依托单位：
University of Hyogo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16657044/
关键词：
生体膜オルガネラシグナル配列トポロジー膜蛋白質生合成

项目摘要

真核細胞の小胞体では、さまざまな蛋白質が膜を透過し、膜蛋白質が膜に組み込まれている。このダイナミックなプロセスにはトランスロコンと呼ばれるポリペプチド鎖膜透過チャネルが関わっている。トランスロコンはきわめて多種類の蛋白質ポリペプチド鎖を容易に膜透過させるという驚異的な作用をもつ。本研究は小胞体トランスロコンにおけるポリペプチド鎖の移動透過過程を一分子レベルで観察し、透過の経時変化、移動速度、移動頻度、方向性などを測定可能とすることを目指した。高純度で高い蛋白質膜透過活性を有する小胞体膜標品の取得、ウサギ網状赤血球溶血液を用いた高効率タンパク質合成系の大量調整を行った。さらに、われわれの発見した1型シグナルアンカー配列のアミノ末端側にジヒドロ葉酸還元酵素(DHFR)ドメインを融合した場合、高効率で膜透過できること、この透過が特異リガンドであるメトトレキセートを添加することによって完全に抑制されること、このリガンドを除去することによって高効率で膜透過を再開できること、この過程には熱ショック関連蛋白質や燐酸高エネルギー化合物は不要なことを明らかにした。さらに、より制御しやすいポリペプチド鎖膜透過制御実験系を確立し、小胞体トランスロコン内には複数のシグナル配列と複数の親水性膜透過途上セグメントが収容されること、膜透過制御要因であるポリペプチド鎖上の正荷電アミノ酸残基が予想外に長距離での効果を発揮できことなどを明らかにしつつある。

Eukaryotic organisms have small cells, membrane proteins and membrane components. This is the first time I've ever seen a woman who's had sex with someone else. A variety of proteins can be easily transmitted through the membrane. This study is aimed at measuring the possibility of the transmission of small cell particles, such as the transmission time, the transmission speed, the transmission frequency and the transmission direction. High purity, high protein membrane permeability, high efficiency, high protein synthesis system In the case of fusion of folate reducing enzyme (DHFR), high efficiency of membrane transmission, complete inhibition of membrane transmission, high efficiency of membrane transmission and high efficiency of membrane transmission. This process is related to protein and phosphate synthesis. The membrane transmission control system is established. The membrane transmission control system is mainly composed of a plurality of groups arranged in the cell structure and a plurality of hydrophilic membrane transmission channels. The membrane transmission control system is mainly composed of a plurality of positively charged acid residues on the cell structure and a plurality of long distance effects.