転写不活性因子ークロマチンの相互作用ネットワークの構造基盤

转录失活子-染色质相互作用网络的结构基础

基本信息

  • 批准号:
    10179218
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.15万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
  • 财政年份:
    1998
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1998 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

(1) Rme1pとUme6pによる転写抑制機構:RmelpとUme6pは,それぞれ減数分裂を開始するIME1およびIME2のrepressorである.最近,我々は,CYCI-lacZをテストプロモータとして用いてそのactivatorであるHap1/2/3pの結合をin vivo UV footprintingによって検出できることを示し,Rme1pが遠隔的に,おそらくクロマチン構造を介してactivatorの結合を阻害することで,IME1の転写が抑制されるというモデルを提唱した(PNAS,94,790,1997).さらに,Rmelpのゲノム上での2つの認識部位を同定した(NAR,26,2329,1998).同様の方法をUme6p-Sin3p-Rpd3p転写抑制系に応用し,Ume6pによる転写抑制機構を検討した結果,Ume6pによる転写抑制が,Rpd3pによるヒストンH4の脱アセチル化だけからは解釈できないという結論を得た.脱アセチル化によるヌクレオソーム構造の安定化の他に,新たな分子機構の存在が示唆された(第21回日本分子生物学会年会,1998).(2) Bme1pの機能構造解析:Rmelpは,タンデムに並んだ3つのZn-fingerモチーフをもつDNA結合蛋白質であるが,このユニークな点は,DNAとの結合にZn-fingerに隣接するC末端領域(CRT)が必須である.このCRT領域に関する点変異の実験を行い,2つの塩基性残基R287,K290と4つの疎水性残基F288/L292,I295/L296がDNAとの結合には必須であることを示した(第21回日本分子生物学会年会,1998).
(1) Rme1p と Ume6p に よ る planning write inhibition mechanism: Rmelp と Ume6p は, そ れ ぞ れ meiosis を began す る IME1 お よ び IME2 の repressor で あ る. Recently, I 々 は CYCI - lacZ を テ ス ト プ ロ モ ー タ と し て in い て そ の activator で あ る Hap1 two-thirds/p の combining を in vivo UV Footprinting に よ っ て 検 out で き る こ と を し, Rme1p が far に, お そ ら く ク ロ マ チ ン tectonic を interface し て activator の combining を resistance against す る こ と で, IME1 の planning write が inhibit さ れ る と い う モ デ ル を mention sing し た (PNAS, 94790199 7) さ ら に On the Rmelp <s:1> ゲノム, the で <s:1> 2 で <s:1> is recognized at the を congruential <s:1> た(NAR,26,2329,1998). With others in の way を Ume6p Sin3p - Rpd3p planning write inhibit department に 応 し, Ume6p に よ る planning write inhibit institutions を beg し 検 た results, Ume6p に よ る planning write inhibit が, Rpd3p に よ る ヒ ス ト ン H4 の ア off セ チ ル change だ け か ら は solution 釈 で き な い と い う conclusion を た. Off ア セ チ ル change に よ る ヌ ク レ オ ソ ー の ム structure stabilization の he に, new た な molecular institutions exist の が in stopping さ れ た (molecular association meeting back to Japan 21, 1998). (2) Bme1p の functional structure: Rmelp は, タ ン デ ム に and ん だ 3 つ の zinc finger - モ チ ー フ を も つ DNA binding protein で あ る が, こ の ユ ニ ー ク な は, DNA と の combining に zinc finger - に 隣 meet す る C terminal area (CRT) が must で あ る. こ の CRT field に masato す る Point - different の be 験 を い, 2 つ の salt basic residues R287, K290 と 4 つ の 疎 waterborne residues F288 / L292, I295 / L296 が DNA と の combining に は must で あ る こ と を shown し た (molecular association meeting back to Japan 21, 1998).

项目成果

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