ATP感受性カリウムチャネルの分子制御機構と生理作用

ATP敏感钾通道的分子调控机制及生理效应

• 批准号: 10217207
• 负责人: 堀尾 嘉幸
• 金额: $ 20.16万
• 依托单位: Sapporo Medical University (1999-2000)Osaka University (1998)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (B)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10217207/
• 关键词: 黒質; 海馬; シナプス; CA3; synaptophysin; カリウム; チャネル; ATP感受性カリウムチャネル; スルフォニル尿素受容体; ニコランジル; 平滑筋; binding assay; 内向き整流性カリウムチャネル; コンダクタンス; ATP; スルホニルウレア受容体; ヌクレオチド

ATP感受性カリウムチャネルはチャネル(Kir)サブユニットとスルフォニル尿素受容体(SUR)サブユニットからなっている。このうち、SURサブユニットはチャネル活性を直接制御すると考えられ、SUR1とSUR2の2つの遺伝子が存在し、さらにSUR2についてはdifferential splicingによってできると考えられるSUR2AとSUR2Bの2つのisoformが存在している。これまで、Weaverマウスという黒質ドーパミン細胞が死滅するマウスについて、一部の黒質細胞が残存するが、この残存細胞はATP感受性カリウムチャネルを発現しており、その中でSURサブユニットではSUR1を発現しているとの報告があった。そこで、実際どのようなSURがどの時期に脳のどの部分でどのように発現しているかを調べるために、SUR1,SUR2AとSUR2Bの特異抗体の作成を試みた。培養細胞に発現させたSURサブユニットを用いて抗体の特異性を検討したところ、SUR2Bの抗体はSUR1も認識したが、SUR2AとSUR2B両者を認識する抗体を併用するとSUR1、SUR2A、SUR2Bの3つのサブユニットを区別することが可能となった。これらの抗体を用いて脳のSURの分布を調べたところ、それぞれのサブユニットで特異的な分布を示していることが判明した。特に、SUR2Bについては、海馬歯状回の顆粒細胞からのaxon(mossy fiber)を受けるCA3領域のstratum lucidumに強い発現がみられ、この発現はsynaptophysinの発現領域に一致しており、presynaptic terminalにSUR2Bは発現している可能性が示唆された。

ATP sensitive receptor SUR1, SUR2 and SUR2 have differential splicing, SUR2A, SUR2B and SUR2B have isoform. The cells in the black matrix were killed, some of the cells in the black matrix were left, and the ATP sensitivity of the remaining cells was detected. The preparation of specific antibodies for SUR1, SUR2A and SUR2B was tested. To investigate the specificity of the antibodies used in SUR servers developed in cultured cells, it is possible to use the antibodies recognized by SUR2B in SUR1 and recognized by SUR2A and SUR2B in combination to distinguish the three servers of SUR1, SUR2A, and SUR2B. The distribution of these antibodies is regulated and the specific distribution of these antibodies is identified. In particular, SUR2B indicates the possibility of occurrence of axon(mosy fiber) in hippocampal dentate gyrus granule cells in CA3 region, which is strongly associated with synaptophysin in CA3 region.

项目成果

Russ U, et al: "Coexpression with the inward rectifier K^+ channel Kir6.1 increases the affinity of the vascular sulfonylurea receptor SUR2B for glibenclamide"Mol Pharmacol.. 56. 955-961 (1999)

Russ U等人：“与内向整流器K 通道Kir6.1共表达增加了血管磺酰脲受体SUR2B对格列本脲的亲和力”Mol Pharmacol.. 56. 955-961 (1999)

Okuyama Y et al.: "The effects of nucleotides and potassium channel openers on the SUR2A/Kir6.2 complex K^+ channel expressed in a mammalian cell line, HEK293T cells"Pflugers Arch. 435. 595-603 (1998)

Okuyama Y等人：“核苷酸和钾通道开放剂对哺乳动物细胞系HEK293T细胞中表达的SUR2A/Kir6.2复合物K 通道的影响”Pflugers Arch。

Kim et al.: "Cloning and functional expression of a novel cardiac two-pore background K+channel(cTBAK-1)" Circ Res.82. 513-518 (1998)

Kim 等人：“新型心脏双孔背景 K 通道 (cTBAK-1) 的克隆和功能表达”Circ Res.82。

Okuyama Y et al.: "The effects of nucleotides and potassium channel openers on the SUR2A/Kir6.2 complex K+channel expressed in a mammalian cell line,HEK293T cells" Pflugers Arch-Eur J.Physiol.435. 595-603 (1998)

Okuyama Y 等人：“核苷酸和钾通道开放剂对哺乳动物细胞系 HEK293T 细胞中表达的 SUR2A/Kir6.2 复合 K 通道的影响”Pflugers Arch-Eur J.Physiol.435。

堀尾嘉幸、 大谷修: "カラー図解 人体の正常構造と機能"日本医事新報社. 100 (2000)

Yoshiyuki Horio、Osamu Otani：“彩色说明人体的正常结构和功能”Nihon Iji Shinposha 100 (2000)。