カリウムイオン可視化によるカリウムチャネル機能評価とその応用
钾离子可视化评价钾通道功能及其应用
基本信息
- 批准号:09273239
- 负责人:
- 金额:$ 1.6万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
- 财政年份:1997
- 资助国家:日本
- 起止时间:1997 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
内向き整流カリウムチャネルファミリーは細胞静止膜電位の形成と安定化、維持あるいは、カリウムの輸送をおこなっているとされている。このなかで申請者らのグループによってクローン化されたKir4.1/KAB-2は脳グリア細胞に発現していることがin situ hybridizationによって明らかとなった。そこでこのKir4.1の分布と機能を調べるために網膜の主要なグリア細胞であるミュラー細胞をもちいてさらに検討した。Kir4.1mRNAはミュラー細胞に発現していた。さらに、Kir4.1抗体を使うことによってチャネル蛋白質自体もミュラー細胞膜上に広く分布していること、Kir4.1は膜上ではパッチ状に集積(クラスタリング)して存在していることが判明した。このクラスタリングの機構を生化学的、細胞生物学的に検討したところ、網膜ミュラー細胞ではSAP97という3つのPDZドメイン、SH3領域、グアニル酸キナーゼ領域をその構造内に持っている細胞内蛋白質がKir4.1のC末端にあるSer-Asn-Valという配列に結合することによってKir4.1-SAP97のコンプレックスができ、さらにSAP97が互いに凝集することによって起きていることがHEK293T細胞を使った再構成実験によってわかった。また、ミュラー細胞のKir4.1の発現はミュラー細胞を培養化することによって消失すること、培養液にインスリンを添加しておくとKir4.1mRNAの発現がおこるが、Kir4.1は細胞質にとどまって膜上に発現しないこと、インスリン存在下にラミニンを作用させると機能を持ったKir4.1の膜上での発現がみられ、この際、Kir4.1は膜上でクラスタリングしていることを見い出した。即ち、ラミニンはKir4.1の細胞質から膜上へのトランスロケーションに働いていることが強く示唆された。Kir4.1の機能は神経細胞が興奮した際に細胞外に放出するK+を吸収し、さらにそのK+を別の部位へ放出するsaptial bufferingをおこなっているものと考えられた。この機能をカリウム蛍光試薬を用いて現在検討している。
The inward rectification system is responsible for the stabilization of the static membrane potential, the maintenance of the membrane potential, and the maintenance of the membrane potential. The applicant
项目成果
期刊论文数量(16)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Okuyama Y, et al.: "Properties of SUR2A/Kir6.2 ATP-sensitive K+ channels expressed in a mammalian cell line,HEK 293T cells." pfulers Archiv European Journal of Physiology. (in press). (1998)
Okuyama Y 等人:“哺乳动物细胞系 HEK 293T 细胞中表达的 SUR2A/Kir6.2 ATP 敏感 K 通道的特性。”
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- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Yamada M, et al.: "Sulfonylurea receptor 2B and Kir6.1 form a sulfonilurea-sensitive but ATP-insensitive K+ channel." Journal of Physiology. 499. 715-720 (1997)
Yamada M 等人:“磺酰脲受体 2B 和 Kir6.1 形成磺酰脲敏感但 ATP 不敏感的 K 通道。”
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Kim DH, et al.: "Molecular cloning and functional expression of a novel weak inward rectifier K+ channel with two pore domains predominantly expressed in heart." Circulation Research. (in press). (1998)
Kim DH 等人:“一种新型弱内向整流 K 通道的分子克隆和功能表达,其两个孔域主要在心脏中表达。”
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Isomoto S, et al: "Sur2 and Kcnj8 genes are tightly linked on the distal region of mouse chromosome." Mammalian Genome. 8. 790-791 (1997)
Isomoto S 等人:“Sur2 和 Kcnj8 基因在小鼠染色体的远端区域紧密相连。”
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Horio Y, et al.: "Clustering and enhanced activity of an inwardly rectifying potassium channel,Kir4.1.by an anchoring protein,PSD-95/SAP 90 family." The Journal of Biological Chemistry. 272. 12885-12888 (1997)
Horio Y 等人:“通过锚定蛋白 PSD-95/SAP 90 家族聚集并增强内向整流钾通道 Kir4.1 的活性。”
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- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
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